【2017年整理】VL70 55培养基配方.doc

培养基配方 一、R2A/R3A培养基 配方g/L）： R2A R3A酵母粉? ?? ?? ?? ???0.5 g 1.0 g胰蛋白胨? ?? ?? ?? ?0.5 g 1.0 g酪蛋白氨基酸（casamino acid）? ?? ?? ?? ? ? 0.5 g 1.0 g葡萄糖? ?? ?? ?? ???0.5 g 1.0 g可溶性淀粉? ?? ?? ?? ?? ? 0.5 g 1.0 g磷酸氢二钾? ?? ?? ? 0.3 g 0.6 g七水硫酸镁? ?? ?? ?? ???0.05 g 0.1g丙酮酸钠? ?? ?? ?? ?0.3 g 0.5g琼脂? ?? ?? ?? ?? ? 15.0 g 15.0 g 用磷酸氢二钾或磷酸二氢钾调pH到7.2后，加蒸馏水，搅拌溶解，121℃灭菌15。  特点 R2A培养基用于水的菌落计数，它可以修复被氯气损伤的细菌，支持耐受氯气的微生物的生长。培养要求，低温（20-30℃）长时间培养（5-7天）这样得到的菌落数比常规菌落总数检测的菌落数更符合实际 R3A培养基主要用于菌株的生化特征描述和鉴定。 参考文献：Reasoner DJ, Geldreich EE. A new medium for the enumeration and subculture of bacteria from potable water. Appl Environ Microbiol. 1985,49(1):1-7. 二、VL55培养基Sait M et al,2002)（土壤筛菌） 配方（g/L） 1× 2× 2-(N-吗啉基)乙磺酸 1.95 g 3.9 g MgSO4 0.024 g（0.2mM） 0.048 g（0.4mM） CaCl2 0.033294 g（0.3mM） 0.066588 g（0.6mM） (NH4)2HPO4 0.02 g（0.2mM） 0.0 g（0.4mM） 亚硒酸盐/钨酸盐溶液 1mL 2mL 微量溶液SL10 1mL 2mL Sait M等取2×的培养基121℃灭菌15min后，冷却至56℃，加入10mL5%（w/v）的木聚糖溶液，2mL的维生素溶液1，6mL的维生素溶液2。 当量3%洗过的琼脂121℃灭菌15min后，冷却至56℃，与前面培养基混匀后倒平板（Widdel F et al.,1992）。 备注： 亚硒酸盐/钨酸盐溶液g/L）：NaOH 0.5 g，Na2SeO3·5H20 3mg，Na2WO4·2H20 4mg，dd H20 1L，溶解混匀，过滤除菌，4℃备用。（Tschech and Pfennig, 1984） 微量溶液SLg/L）：25%HCl 10mL，FeCl2·4H2O 1.5g，CoCl2·6H2O 0.19g，MnCl4·4H2O 0.1g，ZnCl2 0.07g，H3BO3 0.062g，Na2MoO4·2H2O 0.036g，NiCl2·6H2O 0.024g，CuCl2·2H2O 0.017g，dd H20 1L，溶解混匀，过滤除菌，4℃备用。（Widdel F et al.,1981） 微量溶液SL10g/L）：25%HCl 10mL，FeCl2·4H2O 1.5g，CoCl2·6H2O 0.19g，MnCl4·4H2O 0.1g，ZnCl2 0.07g，H3BO3 0.006g，Na2MoO4·2H2O 0.036g，NiCl2·6H2O 0.024g，Cu