酵母菌液态深层通风发酵..doc

酵母菌液态深层通风发酵 一、实验目的 了解通风搅拌罐的发酵过程 学习发酵过程各生理指标的测定 二、实验器材 1分光光度计 2发酵罐 2.1罐体系统 罐身：由硼硅玻璃和不锈钢加工制成。 密封件：机械密封、硅橡胶“O”型圈。 2.2罐盖布局 阀门系统示意图（背面） 2.2.1 控温夹套 控温夹套由控温夹套、1—加热器、2—测温电极、3—水位电极等组成。 2.2.2 灭菌罩 灭菌罩（参见图1）由不锈钢罩体、AQ—安全阀、P2—压力表、17—测温电极（3）等组成。 2.2.3 管阀系统 管阀系统（参见图1）由EW—冷却水电磁阀、7－冷凝器进水阀、W1—溢流水阀、W2—排水排汽阀、S—灭菌罩进蒸汽阀、S2—夹套进蒸汽阀、25—蒸汽回汽管、G-气路调节阀、不锈钢管路、优质胶管、接头等组成。 2.2.4 辅助设备： 由空气压缩机、蒸汽发生器组成。辅助设备属于选购设备 2.2.5 系统安装： ·发酵罐应安装在通风良好、空气洁净的房间, 房间内应经常消毒。 ·将罐体与控制电箱放置在平整桌面上，调节支撑脚确保水平与垂直度。 ·连接进水、排水、空气进气管，并用卡箍固定挟紧，进水端要加水过滤器。 ·将搅拌电机、PH电极、DO电极、泡沫电极、测温电极、水位电极、加热器、电磁阀的电缆接头连接好。 ·接插好黄绿接地线，保证罐体有良好的接地！ 2.3发酵罐电气系统（图3） 2.3.1开机和关机 (参见图3) 在确认发酵罐管路部分和电气部分连接无误后，方可开机进行操作! 开机顺序：接通电源，待控制柜上红色电源指示灯亮后再打开控制柜右下方的红色电源开关，（注意：红色电源指示灯亮后表示控制柜的接线柱电源端子已有电，千万不可用手触摸该接线端子，以防发生触电事故！）然后打开控制柜右侧的工控机电源开关启动工控机；进入windows桌面后点击组态王程序并继续进入发酵程序后暂停操作；（关于发酵控制程序的操作请另见发酵控制系统操作说明书）。根据实际需要分别打开控制柜右侧的搅拌电机、加热器和蠕动泵、电磁阀的电源开关；（工控机电源和搅拌电机、加热器、蠕动泵包括电磁阀的电源开关是分开安装的，如果不需要运行这些部件，则相应的电源开关可以关闭，在此情况下，工控机仍可以开机运行，但不能驱动执行机构）然后继续进行发酵控制参数的设定，（关于发酵控制程序的设定请另见发酵控制系统操作说明书）。待所有控制参数设定完毕并确认无误后再根据要求选择点击各操作界面上的自动或手动运行按钮进入发酵培养。特别注意：搅拌电机的电源必须在发酵程序运行前打开，否则可能会造成搅拌电机飞车，损毁搅拌系统。 关机顺序：关机时必须先点击各操作界面上的停止按钮，确认所有控制项目全部停止后再点击返回按钮回到主菜单界面退出发酵程序；继续退出组态王程序后再退出windows，关闭工控机电源并关闭红色电源开关，（此时控制柜上红色电源指示灯亮着，控制柜的接线柱电源端子仍然带电）最后切断电源，（此时控制柜上红色电源指示灯熄灭）。 三、试剂 （1）1% 3，5-二硝基水杨酸（DNS）试剂：酒石酸钾钠100 g溶于400 mL蒸馏水，加热中依次加入NaOH 5 g，3，5-二硝基水杨酸5 g，苯酚1 g，亚硫酸钠0.25 g，搅拌至溶。冷却后定容至500 mL，储于棕色瓶室温保存。 （2）10%蔗糖溶液 （3）NaOH 1mol/l （4）乙酸缓冲液(0.05mol/ml) pH5.0 四、操作方法 1.灭菌准备工作 ·将排水硅胶软管装在排水排气口上。 ·打开排水排汽阀，放尽控温夹套内的剩余水。 ·关闭溢水阀、冷凝器进水阀、灭菌罩进蒸汽阀、夹套进蒸汽阀、蒸汽回汽管堵头和进空气阀。 ·拔下泡沫电极、液位电极和顶盖接地线的连接插头。 ·取出pH、DO电极进行校验，校验完毕后卸下备用。（该步骤在实罐灭菌时操作） ·取出测温电极。 ·拧下冷凝器进、出水接头。 ·将进气过滤器、尾气过滤器、尾气滤水瓶安装到位。 ·取样放料装置安装就位。 ·将补料瓶安装上呼吸过滤器。 ·打开蒸汽发生器准备提供蒸汽。 2.空罐灭菌 第一步：装上pH电极孔、DO电极孔、三针补料口的堵头并拧紧。 第二步：旋松搅拌电机固定螺栓，卸下电机连接电缆，取下电机，横放在柔软、干燥桌面上。注意电机和电缆的连接口不能进水，以免发生短路！ 第三步：卸下温度电极，拧下蒸汽回气管堵头，盖上灭菌罩，拧紧固定螺丝，插上测温电极。 第四步：点击系统运行进入组态王发酵程序主菜单后选择灭菌辅助程序，设置灭菌温度与灭菌时间，点击开始按钮进入灭菌程序运行。 第五步：打开排水排气阀，打开灭菌罩进蒸汽阀，然后缓缓打开蒸汽发生器的出蒸汽总阀让蒸汽不断进入罐内，使罐体温度不断升高。操作时应密切注意灭菌罩上的压力表指示和控制箱上的温度指示，保证压力不超过0.15Mpa，温度不超过130℃。 第