使用固相萃取-高效液相色谱法测定动物性食品中甲氧苄啶.PDF

使用固相萃取-高效液相色谱法 测定动物性食品中甲氧苄啶 残留量 应用简讯 食品检测与农业 作者 前言 孙锦兰 甲氧苄啶 (Trimethoprim) 是一种广谱抗菌药，抗菌谱与磺胺类药物类似，可作 为兽药用作抗菌剂，也可用于球虫病的治疗。在水产养殖中甲氧苄啶往往与磺 安捷伦科技（中国）有限公司 胺类药物合用，作为磺胺类药物的增效剂。本方法参照食品安全国家标准 GB 29702-2013 ，建立了一种水产品中甲氧苄啶残留分析的高效液相色谱法。该方法 适用于鱼、虾、蟹可食组织中甲氧苄啶残留量的检测。 甲氧苄啶的分析 对试料进行样品前处理。称取试料（大黄鱼、草虾和大闸蟹的肌肉）5±0.05 g ， 于 50 mL 具塞离心管中，依次加入三氯甲烷 15 mL、甲醇 14 mL、0.1 mol/L 硫酸 溶液 6 mL ，旋涡混合 2 min ，5000 rpm 离心 5 min ，取上清液于 250 mL 分液漏斗 中。残渣中加入甲醇 14 mL 和 0.1 mol/L 硫酸溶液 6 mL ，重复提取一次，合并两 次上清液于分液漏斗中。加 2 mol/L 氢氧化钾溶液 2 mL、二氯甲烷 30 mL ，振摇 2 min，静置分层，取下层液于 100 mL 鸡心瓶中。分液漏斗中加二氯甲烷 30 mL ， 重复提取一次，合并两次下层液，于 40 ºC 下旋转蒸发至近干，用 5% 乙酸溶液 6 mL 溶解残余物，作为备用液。 所得备用液经 Agilent Bond Elut Plexa PCX 固相萃取柱净化， 复溶后用滤膜过滤，之后使用配备了 Agilent ZORBAX SB-C18 色谱柱的高效液相色谱系统对其中的甲氧苄啶残留量进行 分析，同时利用 Agilent Poroshell 120 SB-C18 色谱柱进行快 速分离的对比，如图 1 所示为固相萃取操作流程，如表 1 所示为液相色谱分析条件。 图 2. 采用 ZORBAX SB-C18 色谱柱以常规速度分析 0.1 µg/mL 甲氧苄 啶标准溶液 (2A) 、大黄鱼肌肉空白试样 (2B) 、大黄鱼肌肉空白添加 20 µg/kg 甲氧苄啶试样 (2C) 所得色谱图 图 1. 固相萃取操作流程图 表 1. 液相色谱条件 色谱柱 1 ZORBAX SB-C18 ，4.6 × 250 mm ，5 µm 流速 1 mL/min 进样量 20 µL 检测器 紫外检测器 检测波长 230 nm 流动相 甲醇: 0.5% 高氯酸溶液 = 27:73 (v/v) 图 3. 采用 ZORBAX SB-C18 色谱柱以常规速度分析 0.1 µg/mL 甲氧苄啶 色谱柱 2 Poroshell 120 SB-C18，4