土壤微生物的分离.ppt

1.1 掌握涂布平板法、稀释倒平板法、划线分离法分离微生物的操作技术； 1.2 掌握微生物样品稀释法。 1.3 初步掌握无菌操作技术和平板菌落计数法。 3.1.1 土壤样品：按无菌操作要求有目的地取某一类型的土壤。 3.1.2 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基，高氏一号培养基，马铃薯培养基（上次实验成果） 3.1.3 无菌生理盐水。 3.1.4 其它物品： 无菌培养皿，无菌吸管，洗耳球，无菌玻璃涂棒，无菌报纸，药勺，10％酚溶液。 实验报告 1 用文字描述实验项目、实验目的、材料与方法. * * 实验二 从土壤中分离和纯化微生物 1 实验目的 2.1 什么是微生物的纯培养,从固体培养基中分离微生物的方 法有哪些? 2.2 为什么可以根据菌落数目来计算样品中微生物的数量? 2 实验原理 3 材料与方法 3.1 实验器材 3.2 方法（A.稀释涂布平板法） 各管4.5mL无菌水 依次0.5mL，注意更换枪尖 10-4、10-5、10-6；各平板0.1mL 3.2.1 制备土壤稀释液 振荡20 min 三角烧瓶中为什么要加玻璃珠? 取土壤过程中怎样减少杂菌污染? 3.2.2 倒平板 将培养基加热熔化，冷至55－60℃，(在高氏1号培养基中加入 10%酚数滴)，(在马铃薯培养基中加入链霉素溶液至终浓度为 30ug/mL，)混匀后倒入平板。 （操作方法，教师示范） 每平板12 mL 3.2.3 涂布 标记浓度 取菌液 0.1mL 玻璃涂棒灭菌 涂布 静置5－10min 3.2.3 培养 细 菌 霉 菌 放线菌 28℃培养箱 37℃培养箱 倒置培养24-48h 倒置培养3-5天 3.2.4 平板菌落计数 选取平板上长有50－200个菌落的稀释度计算每毫升的含菌量， 同一稀释度的三个重复平板上菌落数应相差不大，且不同稀释度 计算的数据也不应相差太大。 3.2 方法（B.稀释倒平板法） 取样 （0.1mL) 倒平板 （45℃，12mL，旋动) 教师示范 倒置培养 3.2 方法（C.平板划线分离法） 倒平板 划线 （教师示范） 倒置培养 2 实验结果。观察菌落数目、菌落形态特征，数据可设计表格表示。注意用三线表，要求有表格名称，项目清晰。 3 实验分析。比较涂布平板法和稀释倒平板法两种操作方法的结果？作为初学者更适合用什么方法？实验操作中存在什么问题，应如何改进？ *