实验九-土壤微生物的分离与计数.ppt
实验九土壤微生物的分离与计数——涂布平板法一、实验目的1、学习利用平板分离法从土壤分离微生物的基本操作。2、掌握微生物平板计数的方法。二、实验原理土壤是微生物生活的大本营根据某微生物的生长条件(营养,酸碱度,温度,氧气等)而供给它适宜的培养条件,或加入某种抑制剂造成只利于该菌生长,而抑制其他菌生长;用稀释涂布平板法获得单菌落(并不能绝对保证是纯培养,需要结合观察其菌落特征、个体特征,进一步分离纯化)。稀释到适量浓度倾注或涂布平板培养菌落计数样品充分混匀;同一稀释度三个以上重复,取平均值;每个平板上的菌落数目合适,便于准确计数。一般用菌落形成单位(colonyformingunits,CFU)来表示原样品中的细胞数。的土壤数10g,装入已灭菌的牛皮纸袋。土样:选择某一生境土壤,去表层土,挖5~20cm深度01牛肉膏蛋白胨培养基:细菌淀粉琼脂培养基(高氏1号):放线菌——每300ml培养基加入1ml3%的重铬酸钾抑制细菌和霉菌生长马丁氏培养基:真菌——孟加拉红抑制细菌和放线菌培养基:02三、实验材料1、倒平板2、土壤菌悬液的制备四、实验方法10g土样+90ml无菌水振荡20min3、梯度稀释取1ml土壤菌悬液移入含9ml无菌水的试管中,吹吸均匀,为稀释10倍的样品,依次进行梯度稀释10-1~10-6*