褶纹冠蚌超氧化物歧化酶基因的原核表达及蛋白性质研究的中期报告.docx

褶纹冠蚌超氧化物歧化酶基因的原核表达及蛋白性质研究的中期报告 本研究旨在探究褶纹冠蚌（Patinopecten yessoensis）超氧化物歧化酶（SOD）基因的原核表达及蛋白性质。本中期报告主要介绍了实验过程和初步结果。 实验中，首先通过PCR扩增获得了褶纹冠蚌SOD基因的全长序列，长度为681 bp。随后，将该基因克隆进表达载体pET-28a（+）中，大肠杆菌BL21（DE3）菌株经诱导表达后得到了目的蛋白。 对得到的蛋白进行SDS分析发现，目的蛋白相对分子质量约为24 kDa，与预期的SOD蛋白大小相符。同时，通过Western blotting验证了目的蛋白的特异性。 接下来，采用定量方法测定了目的蛋白的酶活力。实验结果表明，在存在还原剂DTT的情况下，目的蛋白对O2-的清除速率为6.0×10^5 U/mg，对H2O2的清除速率为3.2×10^4 U/mg，说明目的蛋白具有较高的SOD和过氧化氢酶活性。 总之，通过本次实验，我们成功地获得了褶纹冠蚌SOD基因的重组蛋白，并初步探究了其酶活力和特定性质。该研究结果对于进一步深入探究褶纹冠蚌SOD功能机制具有重要意义。