重组腺病毒介导的白细胞介素23基因转染人肝癌hepG2细胞的实验研究的开题报告.docx

重组腺病毒介导的白细胞介素23基因转染人肝癌hepG2细胞的实验研究的开题报告

研究背景和意义：

人肝癌是一种恶性肿瘤疾病，其发病率和死亡率一直处于高位。白细胞介素23(IL-23)是由基质细胞、活化的树突状细胞等多种免疫细胞分泌的一种重要的免疫调节因子，其参与体内免疫应答调节、炎症反应调节及神经元损伤修复等多种生理病理过程。IL-23与多种肿瘤的发生发展密切相关。最近的研究显示，IL-23通过调节T细胞、自然杀伤细胞、树突状细胞、肿瘤细胞等多种免疫细胞的生物学功能，发挥着抑制和促进肿瘤生长的作用。因此，深入研究IL-23在肝癌细胞中的作用机制，开发新型的治疗方法，对于肝癌的防治有着积极的意义。

研究目的：

本实验旨在采用重组腺病毒介导的基因转染技术，将IL-23基因转染到人肝癌HepG2细胞中，以探究IL-23在肝癌中的作用机制、对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响，并为开发新型治疗肝癌的策略提供一定的实验数据支持。

研究内容：

1.构建重组腺病毒载体。选取表达IL-23基因的载体进行质粒酶切、连接、转化大肠杆菌DH5α等步骤，筛选得到重组质粒pAdTrack-CMV-IL-23。

2.重组腺病毒包装。将pAdTrack-CMV-IL-23与AdEasy-1质粒转化E.coliBJ5183，并通过蓝白斑筛选、PCR、酶切等方法进行筛选、扩增和纯化，得到功能完整的重组腺病毒载体。

3.体外细胞实验。将重组腺病毒介导IL-23基因转染到HepG2细胞中。通过Westernblotting方法检测IL-23的表达量；CCK-8实验、Transwell?实验检测IL-23对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用；流式细胞术、细胞增殖实验等技术方法分析IL-23对HepG2细胞周期和周期的影响以及诱导凋亡的能力。

研究意义：

本实验将进一步探索IL-23背景下的肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响机制，有助于深入了解IL-23在肝癌中的作用及抑制肝癌生长的机制，对于开发新型肝癌治疗方法、提高治疗效果以及探索肿瘤治疗相关的生物学机制具有积极的意义。