染色體G显带技术及其原理.ppt

染色体G显带技术 及其原理 ;染色体G显带核型图;实验原理 (1);实验原理(2) ; Giemsa染料的发明者:Gustav Giemsa;实验原理 (3);;实验原理 (4);实验原理 (5);实验原理(6);实验原理(7);;;;;;实验用品(1);实验用品(2);实验用品（3）;2.5％胰蛋白酶原液的配制： 胰蛋白酶粉末（1:250）2.5g，100ml 生理盐水，过滤除菌，分装成1ml小瓶于 -20℃保存，用于消化细胞和染色体G显带标本的制作。;生理盐水的配制 氯化钠（NaCl）8.5g，加三蒸水至1000ml，用溶液瓶分装，高压灭菌9 磅，10分钟，可用于细胞培养。 ;Giemsa存储液的配制 Giemsa粉末1g加少许甘油混合研碎→共计加入甘油66ml，充分混匀→倒入烧杯中在55~60℃水浴中加热2小时→冷却→加入甲醇66ml，充分混合→在室温中静置2~3周，过滤贮存于棕色瓶中，可长期使用。 ; 1/15mol/L 磷酸缓冲液（Phosphate Buffer Solution，PBS）的配制 甲液：1/15mol/L Na2HPO4溶液 Na2HPO4 ?????????????????? 9.465g 蒸馏水????????? ??????????加至1000ml 乙液：l/15mol/L KH2PO4溶液 KH2P04???????????????????? 9.07g 蒸馏水??????????????????? 加至1000m1 分装在瓶内，于室温保存，用时甲、乙两液各按不同比例混合，即可得所需pH的缓冲液。 ;pH;2×SSC溶液的配制 用分析天平称取氯化钠17.53克，柠檬酸钠8.82克溶于蒸馏水中，加蒸馏水至1000毫升。;实验方法;(一) 胰蛋白酶消化法;(一) 胰蛋白酶消化法;(一) 胰蛋白酶消化法;(一) 胰蛋白酶消化法;(二)胰蛋白酶－EDTA法 ;(二)胰蛋白酶－EDTA法 ;(二)胰蛋白酶－EDTA法 ;(三)ＡＳＧ(Acetic-saline-Giemsa)法 ;注意事项;影响G显带的一些因素（1）;影响G显带的一些因素（2）;影响G显带的一些因素（3）;影响G显带的一些因素（4）;影响G显带的一些因素（5）;影响G显带的一些因素（6）;染色体G显带失败标本的补救方法(1);染色体G显带失败标本的补救方法(2);染色体G显带失败标本的补救方法(3);谢谢!