胶体金免疫层析法检测技术操作规程.pdf

胶体金免疫层析法检测技术操作规程

A1原理

本方法采用竞争抑制免疫层析原理。样品中的待测物质与胶体金标记的特异性抗体结合，

抑制抗体和试纸条中检测线（T线）上抗原的结合，从而产生检测线颜色深浅的变化，通过

检测线与控制线（C线）颜色深浅比较，对样品中待测物质进行定性判定。

A2材料及设备

A2.1免疫胶体金快速检测试剂卡：密封包装，干燥阴凉处保存，用前恢复至室温（20℃±5℃），

即开即用。

A2.2电子天平：感量0.01g。

A2.3离心机：转速不低于4000转。

A2.4微量移液器：10μL-200μL。

A2.5胶体金试剂卡读卡仪。

A3测定步骤

A3.1试样制备与储存

抽样后，将样品分为检样和备样各一份，每份不少于100ml(g)。检样立即测试或-20℃

以下冷冻待测，备样-20℃以下冷冻保存，有效期不超过6个月。

A3.2净化（必要时）

若待测样液呈浑浊状态，采取离心机离心（4000转，5分钟）或静置10分钟后，再进

行测定。

A3.3测定

免疫胶体金快速检测试剂卡（A2.1），恢复至室温后，从包装袋中取出，置于水平台

面上。用微量移液器吸取100μL清澈样液，加至免疫胶体金快速检测试剂卡的加样孔中，

在6min-8min内读取检测结果。

A4结果判断

阴性（－）：T线显色强于C线显色或与C线显色无明显差异，表示样本中不含有待检

物或浓度低于检测限。

阳性（＋）：T线显色明显弱于C线显色或T线不显色表示样本中待检物浓度等于或高

于检测限。

无效：未出现C线，表明不正确的操作过程或试纸条已失效。

当出现肉眼无法判断T线与C线的显色差异时，使用胶体金试剂卡读卡仪（5.5）进行

结果判断。