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伊红染色液(醇溶) 操作步骤及注意事项.pdf

发布:2017-12-10约1.34千字共3页下载文档
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伊红染色液(醇溶) 操作步骤及注意事项 规格:100ml/500ml 货号:G1108 保存:常温避光保存,有效期为1年。 产品说明: 伊红(Eosin)又称曙红,属人工合成染料中的呫吨类染料,为桃红色或粉红色的粉末。伊红(醇 溶)分子式为C20H8Br4O5,分子量为649.9。伊红最适宜不苏木精配合染色以显示正常或病 理组织的形态结构。 伊红染色液(醇溶)采用特有防腐剂,操作简单,丌使用汞、甲醇等有毒试剂。常用于组织切 片或培养细胞的染色,染色后细胞浆呈粉红色或红色。 自备材料: 系列乙醇、4%多聚甲醛 操作说明: 1、样品处理 a) 对于石蜡切片: 1) 二甲苯 (I)中脱蜡5-10min。 2) 换用新鲜的二甲苯 (Ⅱ),再脱蜡5-10min。 3) 无水乙醇5 min。 4) 90%乙醇2min。 5) 70%乙醇2min。 6) 蒸馏水2min。 b) 对于冰冻切片: 经固定的切片置蒸馏水2min。 c) 对于培养细胞: ①4%多聚甲醛固定10min 以上, ②蒸馏水洗涤2min, ③换用新鲜的蒸馏水,再洗涤2min。 2、伊红染色 对于上述处理好的样品,伊红染色液染色0.5-2min(根据染色结果和要求调整时间)。 如果需要直接观察,可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行,70% 乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。 注:如果用于免疫组化等染色后的复染,参考上述步骤在其它染色完成后进行伊红染色。 3、脱水、透明、封片或进行其它染色 a)脱水、透明、封片: 1) 95%乙醇脱水2min。 2) 更换新鲜的95%乙醇再脱水2min。 3) 二甲苯透明5min。 4) 更换新鲜的二甲苯,再透明5min。 5) 用中性树胶或其它封片剂封片。 6) 显微镜下观察,细胞浆呈粉红色或红色。 b)进行其它染色: 如果进行免疫荧光染色或进行Hoechst等荧光染料的染色,在伊红染色液染色后: 70%乙 醇洗涤2次,每次2min。 PBS或生理盐水或TBS或TBST等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5min。进行免疫 荧光染色或其它荧光染料的染色。 注意事项: 1、 如果需要脱水、透明和封片处理,需自备二甲苯,中性树胶或其它封片剂。 2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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