马铃薯犛犌犜3 基因表达及其启动子功能分析.pdf

草 业 学 报 第 卷 第 期 １９６－２０６ ２３ ２ 　　　 　 　 　 　　　 　 年 月 ， ２０１４ ４ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ Ｖｏｌ．２３Ｎｏ．２ 　　　 　　　 马铃薯犛犌犜３基因表达及其启动子功能分析 ， １ １ １ １２ １ １ 崔同霞 ，白江平 ，魏桂民 ，赵旭 ，王蒂 ，张金文 （ 甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室 甘肃省干旱生境作物学重点实验室 甘肃农业大学农学院， １． 甘肃 兰州 ； 甘肃省农垦农业研究院，甘肃 武威 ） ７３００７０２． ７３３００６ 摘要：鼠李糖转移酶（ ）是植物糖苷生物碱合成的关键酶，它主要调控 茄碱和 查茄碱 ｒｈａｍｎｏｓｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅＳＧＴ３   ｙ α α 从其 形式的转化。本文研究马铃薯栽培种 ＳＧＴ３基因的表达特点及其启动子的功能。实时定量 ＰＣＲ结果发现 β 在红光照射 后， 的表达量是黑暗处理的 倍，说明红光显著诱导了 的表达；为进一步分析该基 ２４ｈ ＳＧＴ３ ２６．８ ＳＧＴ３ 因的光调控机理，本项研究克隆到 ＳＧＴ３上游长度为 ２４４９ｂｐ的启动子序列，通过分析发现该启动子的转录起始位 点位于翻译起始位点上游－１５２ｂｐ，同时确定了该启动子核心序列及上游增强子、抑制子序列，受病原菌、损伤、干 旱、 激素及一系列光调控的顺式元件。构建不同长度（ ， ， ， 和 ）的该启动子驱动报告基 ＡＢＡ ３４９５７２９７９１３１２ １８７０ｂｐ 因ＧＵＳ的植物表达载体并转化烟草。结果证明，不同长度的 ＳＧＴ３启动子都可以启动 ＧＵＳ表达，但没有 ＣＭＶ 启动的 表达量高；其中在 和 的表达强度较高，这可能与该片段含有启动子的正调控元件（ ３５Ｓ ＧＵＳ Ｐ５７２ Ｐ９７９ ＧＡ ， ）有关， 表达强度在 和 中明显减弱，预测到该区段存在抑 ＴＡＢＯＸ５′ＵＴＲＰＹＲＩＣＨＳＴＲＥＴＣＨ ＧＵＳ Ｐ１３１２ Ｐ１８７０ 制基因表达的负调控元件（ ）； 启动子的组织特异性实验表明 染色主要集中在烟草叶片的叶