肝功能检验幻灯片.ppt

2、激素及维生素代谢 激素的灭活 多种维生素的储存与转化  二、血清酶测定 （1） ALT的测定（赖氏法） 原理：丙氨酸+α-酮戊二酸 谷氨酸+丙酮酸 （2）方法评价 ①赖氏法的实验结果需与卡门分光法的结果对比后求出； ②NaOH的浓度对显色有影响； ③该法的重复性差。 ALT测定连续监测法（速率法） 原理：L-丙氨酸+α-酮戊二酸 L-谷氨酸+丙酮酸 丙酮酸+NAD+ (2) 方法评价： 　　　磷酸苯二钠比色法与更早的β-甘油磷酸钠法相比具有较大的优点，如水解速度快，保温时间较短、灵敏度较高、显色稳定、不需去蛋白、操作简单、快速。 　　　但与磷酸对硝基酚连续监测法相比，准确度、精密度较低；操作比较繁琐,，灵敏度低。 (2) 方法评价 【单位定义】： (2) 方法评价 胆红素BOD测定法 原理： 胆红素 胆绿素 （一）胆红素的类型 未结合胆红素 又称“间接反应胆红素” 或“间接胆红素” 。 结合胆红素 又称“直接反应胆红素” 或“直接胆红素”。 #11 δ-胆红素 与重氮反应呈直接阳性 两类胆红素的比较 未结合bilirubin 结合bilirubin 水溶性 小 大 与G醛酸结合 未结合 结合 与血浆Alb亲和力 大 小 细胞膜通透性及毒性 大 小 与重氮试剂反应 间接阳性 直接阳性 能否通过肾随尿排出 不能 能 常见其他名称 间接、血bil 直接、肝bil δ-胆红素 在肝C损伤及胆汁郁滞等高结合胆红素性黄疸时，Alb中赖氨酸残基的ε-氨基与胆红素一个丙酸基的羧基形成酰胺键，使得胆红素与白蛋白共价结合，这样形成的胆红素称为 δ -胆红素。 卡门氏单位：1.0ml血清在25℃，340nm，反应体积3.0ml,光径1.0cm时每分钟测定吸光度下降0.001，即消耗4.82 ? 10-4μmol NADH为一个卡门氏单位 【参考范围】 5～25卡门氏单位 【临床意义】 (2) 慢性活动性肝炎或脂肪肝： (1) 肝细胞损伤的灵敏指标: ALT轻度增高(100～200IU),或属正常范围. LDH 乳酸+NADH ALT （２） 方法评价： ①存在着两个副反应，会使测定结果偏高； A、血清中存在的α-酮酸(如丙酮酸)能消耗NADH。 B、血清中谷氨酸脱氢酶(GLDH)增高时，在有氨存在条件下，亦能消耗NADH。 ②双试剂法，因温育期长，能有效地消除干扰反应，测定准确性高，是ALT测定的首选方法； ③血清不宜反复冰冻保存，以免影响酶活性；避免使用溶血标本。 3.赖氏法测定AST （１）原理与方法评价（类似ALT测定）　 【参考范围】 8～28卡门氏单位 【临床意义】 增高见于： 心肌梗死、肌炎、胸膜炎、肾炎及肺炎和各种肝病病人 4．连续监测法测定AST （１）原理：　 L-门冬氨酸+α-酮戊二酸 草酰乙酸+L- 谷氨酸 草酰乙酸+NADH L-苹果酸+NAD+ 　 　双试剂法 :同ALT测定 MDH AST （２）方法评价 误差来源 内源性干扰:主要来自血清中高浓度丙酮酸和L-谷氨酸脱氢酶(GLDH)。 外源性:干扰来自试剂中污染的GLDH和AST。 【参考范围】 5～40 IU/L(连续监测法测定)　　 【临床意义】 见赖氏法 (二)ALP测定 化学法 连续监测法： 鲍氏法 金氏法 皮氏法 １、金氏法测定ALP （１）原理： 　　磷酸苯二钠 酚+磷酸 酚+4－AA-P