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黑木耳核糖体失活蛋白基因的克隆的任务书.docx

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黑木耳核糖体失活蛋白基因的克隆的任务书

任务名称:黑木耳核糖体失活蛋白基因的克隆

任务描述:

黑木耳是一种常见的食用菌,其具有良好的营养价值和药用价值。本任务旨在克隆黑木耳的核糖体失活蛋白基因,对其功能进行研究,为黑木耳的遗传改良以及生产利用提供理论基础。

任务要求:

1.设计引物对黑木耳中的目标基因进行PCR克隆;

2.提取黑木耳总RNA并反转录合成cDNA;

3.进行RT-PCR验证克隆的目标基因;

4.构建目标基因的原核表达载体,进行大量表达并纯化目标蛋白;

5.对目标蛋白进行生物学性质鉴定,分析其功能和表达特点。

预期阶段时间节点:

1.引物设计与PCR克隆:1周;

2.RNA提取及cDNA合成:2天;

3.RT-PCR验证克隆:1周;

4.目标基因的原核表达载体构建:1周;

5.目标蛋白的大量表达、纯化和功能鉴定:3周。

工作计划:

1.第1周:了解实验流程,设计引物并进行PCR反应,克隆目标基因;

2.第2周:提取黑木耳总RNA并进行反转录合成cDNA,进行RT-PCR验证克隆的目标基因;

3.第3周:构建目标基因的原核表达载体,并进行质粒测序;

4.第4周~第6周:进行大量表达并纯化目标蛋白;

5.第7周~第9周:对目标蛋白进行生物学性质鉴定,分析其功能和表达特点。

相关参考文献:

1.Chen,C.,Beaudry,R.M.(2003).TheantibacterialactivityofLentinulaedodesdiskandstalkextracts.Mycologia,95(5),967-973.

2.Liang,C.,Mao,L.,Luo,X.,Zhou,X.(2016).EffectsofthermalprocessingonantioxidantandimmunomodulatoryactivitiesofpolysaccharidesfromLentinusedodes.JournaloftheScienceofFoodandAgriculture,96(10),3426-3431.

3.Okuno,T.,Sato,T.(2001).CatalogueofgenesfoundamongcDNAsfromLentinulaedodesfruitingbody.Mushroombiologyandmushroomproducts,8,25-69.

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