动物蛋白质的胃蛋白酶消化率(体外消化).doc

动物蛋白质的胃蛋白酶消化率（体外消化） 一、适用范围： 本方法适用于动物性原料品质的判定。 二、原理： 用脱脂的样本在一个热的胃蛋白酶溶液中，稳定地不断搅拌约16小时，予以消化。测定它的蛋白质含量。这种方法不能用于植物蛋白质饲料原料或混合饲料，因为，它们所含复杂的碳水化合物是不能被胃蛋白酶消化的。将溶解了的蛋白质全部作为可消化的，并用其对粗蛋白质的百分率来表示。 三、设备： 1、恒温水浴振荡器：45±2℃。 2、测定粗蛋白质的全套设备。 3、过滤装置。 4、索氏脂肪浸提器。 四、试剂： 除测定粗蛋白质用的试剂外，尚需以下试剂： 1、0.2%胃蛋白酶溶液的配制：先稀释6.1ml盐酸到1L。在使用前，现配0.2%胃蛋白酶溶液。 2、所有胃蛋白酶应具有1：3000的活性。 3、加热稀盐酸至42—45℃，然后加入胃蛋白酶2g,轻轻地搅动，使其溶解（此时不要加热！）。即得在0.75mol/L盐酸中的0.2%胃蛋白酶溶液。 五、测定步骤： 1、准确称取1g脱脂试样，放入300ml碘量瓶内，加入经过预热（42—45℃）的0.2%胃蛋白酶溶液150ml，盖好塞子，在45℃下边搅拌边消化16小时，消化后用滤纸过滤，然后用温水洗净滤纸上的不消化物。将不消化物连同滤纸转入消化管中，按照测定粗蛋白质含量的方法，测定不消化物中的粗蛋白质含量。 2、另取1份脱脂分析试样，按照测定粗蛋白质含量的方法，测定其粗蛋白质含量。然后，根据消化的和不消化的粗蛋白质含量计算出试样的胃蛋白酶消化率。 六、测定结果计算与分析： 1、计算： 动物蛋白质胃蛋白酶消化率（%）= A-B ×100 A 式中：A—试样中粗蛋白质的含量（%）。 B—试样中的不消化物粗蛋白质的含量（%）。 2、分析： 合格的鱼粉，其粗蛋白质的胃蛋白酶消化率应不小于85%；羽毛粉应在75%以上。 植物油脂检验 不皂化物测定法GB 5535-85 本标准适用于商品植物油不皂化物的测定。 油脂中不皂化物即油脂皂化时，与碱不起作用的，不溶于水的物质，包括留醇，脂溶性维生素的色素等。 一、仪器和用具： 锥形瓶：250 ml 冷凝管 恒温水浴锅 电炉 分液漏斗：250 ml 量筒：50 ml 索氏抽提器 电热恒温烘箱 烧杯、试剂瓶等 天平：感量0.001 g 二、试剂： 1.0N氢氧化钾乙醇溶液 0.5N氢氧化钾水溶液 乙醇、乙醚 中性乙醚乙醇混合液(2：1) 三、操作方法： 称取混匀试样5g（W）注入锥形瓶中，加1.0N KOH乙醇溶液50 ml，连接冷凝管，在水浴锅上煮沸约30 min，煮到溶液清澈透明为止。用50 ml蒸馏水将皂化液转移入分液漏斗中，加入50 ml乙醚，趋温热时猛烈摇动1 min后，静止分层。将下层皂化液放入第二只分液漏斗中，每次用50 ml乙醚提取两次。合并乙醚提取液，加水20 ml轻轻旋摇，待分层后，放出水层，每次再加水20 ml猛烈振摇洗涤两次。 先后用0.5N KOH水溶液和水各20 ml，充分振摇洗涤一次，如此再洗涤两次。最后用水洗至加酚酞指示剂时不显红色为止。 用索氏抽提器回收乙醚，将抽提瓶中的残留物在105℃温度下烘1h，冷却称重，再烘30 min，直至恒重为止。将儿重后的残留物溶于30 ml中性乙醚乙醇中，用0.02N氢氧化钾滴定至粉红色。 四、结果计算： 油脂中不皂化物含量按下列公式计算： 不皂化物（%）= 式中：W1——残留物重量，g W——试样重量，g V——滴定所消耗的氢氧化钾溶液体积，ml N——氢氧化钾溶液的当量浓度 0.28——每毫克当量的油酸重量，g 双试验结果允许差不超过0.2%，求其平均数，即为测定结果。测定结果取小数点后第一位。 过氧化值的测定 一、适用范围： 本方法适用于油脂及动物性原料的测定。 二、原理： 油脂氧化过程中，产生的过氧化物，与碘化钾作用，生成游离碘；以硫代硫酸钠溶液滴定，计算含量。 三、试剂： 1、饱和碘化钾溶液：称取14g碘化钾，加10ml水溶解，必要时微热加速溶解，冷却后贮于棕色瓶中。现用现配 。 2、三氯甲烷冰乙酸混合液：量取40ml三氯甲烷，加60ml冰乙酸，混匀。 3、0.02mol/L硫代硫酸钠标准溶液：称取5g硫代硫酸钠（Na2S2O3 ·5H2O）（或3g无水硫代硫酸钠），溶于1000ml水中，缓缓煮沸10分钟，冷却。放置两周后过滤备用。 4、1% 淀粉指示剂：称取可溶性淀粉0.5g，加入少许水调成糊状倒入50ml沸水中调匀，煮沸，现用现配。 四、测定步骤： 精确称取2—3g混匀的样品 ，置于250ml碘量瓶中，加30ml三氯甲烷冰乙酸混合液，使样品完全溶解；加入1.00ml饱和碘化钾溶液。紧密塞好瓶塞，并轻轻振摇0