微生物学实验课一全解.ppt

医学微生物实验 Experiment of Medical Microbiology 实验一 实验器材： 1.显微镜、香柏油、二甲苯、擦镜纸、纱布等。 2.染色标本 (基本形态4)(特殊结构3)(红细胞与葡萄球菌对比标本1) 实验原理： 1.显微镜的构造： 普通光学显微镜的构造可分为两大部分：一为机械装置，一为光学系统，这两部分很好的配合，才能发挥显微镜的作用。 （1）显微镜的机械装置 显微镜的机械装置包括镜座、镜筒、物镜转换器、载物台、推动器、粗动螺旋、微动螺旋等部件。 （2）显微镜的光学系统 显微镜的光学系统由反光镜，聚光器，接物镜，接目镜等组成，光学系统使物体放大，形成物体放大像 。 根据物镜放大率的高低，可分为： ①低倍物镜 10×； ②高倍物镜 40×； ③?油浸物镜 100×。 普通光学显微镜常用的目镜为10倍平场目镜（P）。 显微镜的几个常用系数： a.放大倍数=接物镜放大倍数×接目镜放大倍数 b. 分辨率 ： 是表示显微镜辨析物体（两端）两点之间距离的能力。 c. 数值孔径 ：也叫做镜口率（或开口率），它与显微镜的分辨力成正比，与焦深成反比，与镜象亮度的平方根成正比。 2.油镜使用的原理 实验方法： 一、观察前的准备 1、显微镜移动时，要用右手紧握镜臂，左手托住镜座，平稳地将显微镜放在实验桌上。 2、将显微镜放在自己身体的左前方，离桌子边缘约10cm左右，右侧可放记录本或绘图纸。 3、调节光照:打开光源，并将光圈调到100的位置，调节光源旋钮，使视野达到最亮。 4、调节瞳距：双筒显微镜可以调节瞳距，将刻度对准使用者瞳距大小的位置，可以使视野更加清晰。 使用油镜按下列步骤操作： 1、先用粗调节旋钮将镜筒提升（或将载物台下降）约2cm，并将高倍镜转出。 2、在玻片标本的镜检部位滴上一滴香柏油（盖玻片朝上，油滴在盖玻片中间或者有明显颜色的位置）。 3、从侧面注视，用粗调节旋钮将载物台缓缓地上升，使油浸物镜浸入香柏油中，使镜头几乎与标本接触（物镜头弹簧刚好被压缩回去即停止旋转旋钮）。 4、从接目镜内观察，用粗调节旋钮将载物台徐徐下降，当出现物像一闪后改用细调节旋钮调至最清晰为止。如油镜已离开油面而仍未见到物象，必须再从侧面观察，重复上述操作。 下降载物台，将油镜头转出，先用擦镜纸擦去镜头上的油，再用擦镜纸蘸少许乙醚乙醇混合液擦去镜头上残留油迹，最后再用擦镜纸擦拭2—3下即可，（注意向一个方向擦拭）。 将各部分还原，转动物镜转换器，使物镜头不与载物台通光孔相对，而是成八字形位置，再将载物台下降至最低，降下聚光器，反光镜与聚光器垂直，最后用柔软纱布清洁载物台等机械部分，然后将显微镜放回柜内或镜箱中。 1.学生使用显微镜固定镜号、位置，填写使用卡，本学期一直使用本台显微镜。 2.不准擅自拆卸显微镜的任何部件,以免损坏。 3.镜面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布，以保证光洁度。 4.观察标本时，当目视接目镜时，物镜头弹簧缩回去之后，切不可继续顺时针使用粗调节器，以免压碎玻片或损伤镜面。 5.拿显微镜时，一定要右手拿镜臂，左手托镜座，不可单手拿，更不可倾斜拿。 细菌的基本形态: 球菌: 直径约1μm。不同的球菌排列方式不同，有不同的名称。如葡萄球菌、链球菌、双球菌、四联球菌、八叠球菌等。 杆菌:bacillus 长短粗细很不一致。长从 0.6μm至10μm，大多数长2-3μm。 螺形菌:spiral bacteria 菌体弯曲。 一个弯曲为弧菌（vibrio), 数个弯曲为螺菌（spirilum)。 葡萄球菌（革兰染色） 链球菌（革兰染色） 大肠杆菌（革兰染色） 弧菌（革兰染色） 细菌的特殊结构: 鞭毛：大肠杆菌 芽孢：破伤风梭菌 菌毛：(光镜下看不到) 荚膜：肺炎双球菌 大肠杆菌的鞭毛（特殊染色） 破伤风梭菌的芽孢（特殊染色） 肺炎双球菌的荚膜（特殊染色） 细菌的形态和结构 ：观察示教片：8张 鞭毛的形态、数量、位置 大肠杆菌 鞭毛 芽胞在菌体上的位置、大小 破伤风梭菌 芽胞 荚膜大小与菌体的关系 肺炎球菌 荚膜 细菌 特殊 结构 霍乱弧菌 弧菌 大肠杆菌 杆菌 形状、大小、排列方式 葡萄球菌 链球菌 球菌 细菌 基本 形态 重点观察 示教片 观察内容 * * * * * * * * * * *