学习班课件风湿免疫病的实验室检测.ppt
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U1RNP的自身免疫有很强的异质性,是多位点,多克隆的。 U1RNP与Sm B/B 表位有同样的氨基酸序列。在膜条的检测中靠排除法来确定。 抗可提取性核抗原(ENA)分子量 anti-extractable nuclear antigen antibodies Sm: 28/29,13.5 KD nRNP: 73,32,17.5 KD SSA: 52,60 KD SSB: 45,47,48 KD SCL-70: 86,70KD Jo-1: 55 KD rRNP 38,16.5,15 KD Sm U1RNP BB’ 28/29KD 69.9% ID法与U1RNP抗体符合率=74.4% ID法不支持抗Sm抗体 N= 2096 抗SSA、SSB抗体 抗SSA抗体在SLE中阳性率为40~50%;PSS中60~70%。在ARD中为40~75%。 在ScLE中可出现ANA(-),抗SSA抗体阳性。 抗SSB抗体ARD中阳性率为40%左右。约50%抗SSA抗体阳性患者伴有抗SSB抗体出现。我院实验室未见有单独出现的案例。 抗可提取性核抗原(ENA)分子量 anti-extractable nuclear antigen antibodies Sm: 28/29,13.5 KD nRNP: 73,32,17.5 KD SSA: 52,60 KD SSB: 45,47,48 KD SCL-70: 86,70KD Jo-1: 55 KD rRNP 38,16.5,15 KD 两种方法抗SSAab检测结果的比较n=1075 检测结果 例数(%) SLE SS 52KD(-)ID(+) 90(8.8) 64 16 52KD(+)ID(-) 83(7.7) 15(各种CTD并伴有其他抗体) 抗Scl-70抗体:SSc标记抗体,在SSc中阳性率约20-70%。 抗JO-1抗体:标记抗体,PM/DM中阳性率约 20%。 抗rRNP抗体:SLE的标记抗体。与抗Sm、 抗ds-DNA抗体有交叉并相关。与抗SSA、抗AcL抗体相关,与SLE精神症状相关。 抗ENA抗体检测方法 对流免疫电泳法( CIE) 免疫双扩散法(ID or DID) 免疫印迹法(IB) 酶联免疫吸附法(ELISA) 蛋白芯片(Protein chip) 不同检测方法中抗原的不同性 对流电泳及双扩散:多组分、粗抗原。 免疫印迹法:多组分抗原经SDS分 离后转印至硝酸纤维素膜上。 斑点印迹,ELISA,芯片技术:单个纯化抗 原或重组的蛋白。 ENA检测存在的问题 检验人员对试剂的来源以及产生的原理缺少了解,对检测中出现的有些问题不能给出客观的解释和解决方法。 由于方法之间的差异或抗体结合能力不同,不同试剂间的比对符合率差异较大。检测结果不能通用。 不能用抗核抗体检测代替抗ENA抗体检测。 类风湿关节炎自身抗体的检测 RA的生物标志及进展 ? 遗传标志物: HLA ? 炎性标志物: 抗血管紧张素转化酶;补体活化产物;血浆淀粉样变蛋白 SAA…… ? 组织破坏特异性标志物: 透明质酸;? ?型胶元;组蛋白…… ?自身抗体: APF;AKA;Sa;RA33;CCP…… RA相关自身抗体的产生 RA病人免疫机制出现异常 自身成分 作为异体抗原 T细胞 巨噬细胞 MHC T细胞诱导 B细胞产生自身抗体 RA血清学标志的发生和进展 APF(64年)AKA(79年) 共同靶抗原Filaggrin(85年) CCP(98年) 瓜氨酸是RA血清抗Filaggrin相关抗体识别的主要组成性抗原决定簇 类风湿关节炎相关的自身抗体 1 抗角蛋白抗体(AKA) 2 3 抗环瓜氨酸多肽抗体(anti-CCP) 4 抗核周因子(APF) 类风湿因子 APF (+) APF (--) AKA (+) 点片状 AKA (--) CCP
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