实习一毒理学动物实验基础.doc

实习一 毒理学实验基础【实验设计的原则】 毒理学作为一门动物实验课程，应该遵循动物实验中对照、重复和随机三个基本原则。【】【实验动物】【大鼠的捕捉及固定】大鼠的门齿很长，在抓取方法不当而受到惊吓或激怒时易将操作者手指咬伤,所以,不要突然袭击式地去抓它，取用时应轻轻抓住其尾巴后提起，置于实验台上，用玻璃钟罩扣住或置于大鼠固定盒内，这样即可进行尾静脉取血或注射。如要作腹腔注射或灌胃等操作时，实验者应戴上手套 有经验者也可不戴 ，右手轻轻抓住大鼠的尾巴向后拉，但要避免抓其尖端，以防尾巴尖端皮肤脱落，左手抓紧鼠两耳和头颈部的皮肤，并将大鼠固定在左手中，右手即可进行操作。【】 【实验动物的编号及标记方法】好的标记应达到清晰、耐久、简便适用的要求。常用的方法有化学染色法，耳缘剪口法或打小孔法，挂牌法及烙印法。化学染色法染色标记法是用毛笔或棉签蘸取化学药品，在实验动物体表不同部位涂上斑点，以示不同编号。常用染色液：3％～5％的苦味酸溶液 染成黄色 ；0.5％的中性品红溶液 染成红色 用一种染色剂染动物的不同部位，颜色可标记1～10号。若用两种颜色的染液配合使用，其中一种颜色代表个位数，另一种颜色代表十位数，可编到99号。例如要标记12号，就可以在左前腿涂上红色，左腹部涂上黄色。 染色法简便清晰，适用于短期实验。若实验时间较长，颜色可自行消褪，再加上动物之间互相摩擦，尿、水浸湿被毛等原因，均可使编号不清，为避免褪色，每隔2～3周可重染一次。 【实验动物的分组】 . 随机分组：【染毒技术】 腹腔注射 大鼠腹腔注射可以用5ml的注射器，配合5.5～7号针头。 腹腔注射时右手持注射器，左手的小指和无名指抓住大鼠的尾巴，另外三个手指抓住大鼠的颈部，使大鼠的头部向下。这样腹腔中的器官就会自然倒向胸部，防止注射器刺入时损伤大肠、小肠等器官。进针的动作要轻柔，防止刺伤腹部器官。 尤其是对于体重较小的大鼠，腹腔注射时针头可以在腹部皮下穿行一小段距离，最好是从腹部一侧进针，穿过腹中线后在腹部的另一侧进入腹腔，注射完药物后，缓缓拔出针头，并轻微旋转针头，防止漏液。 大鼠腹腔注射的给药容积一般为5～10ml/kg。大鼠尾静脉注射注射器刺入【实验动物的处死】1. 颈椎脱臼处死法 此法是将实验动物的颈椎脱臼，断离脊髓致死，为大，小鼠最常用的处死方法。操作时实验人员用右手抓住鼠尾根部并将其提起，放在鼠笼盖或其他粗糙面上，用左手拇指，食指用力向下按压鼠头及颈部，右手抓住鼠尾根部用力拉向后上方，造成颈椎脱臼，脊髓与脑干断离，实验动物立即死亡。【生物材料的收集】