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发酵工程专业优秀论文 直接发酵法生产L-色氨酸的研究 关键词：谷氨酸棒状杆菌 L-色氨酸 诱变育种 摇瓶发酵 接发酵法 菌株选育 摘要：本文以谷氨酸棒杆菌FC22为出发菌株，对直接发酵法生产L-色氨酸进行了研究。主要研究内容和结果如下： 1.采用对二甲氨基苯甲醛比色法对发酵液中的L.色氨酸含量进行了定量分析。对比色法中影响L-色氨酸含量测定的因素进行了研究，并用单因素试验优化了实验条件，得出了对二甲氨基苯甲醛比色法测定L-色氨酸含量的最佳检测条件，从而建立了快速测定发酵液中L-色氨酸含量的方法。在最佳检测条件下，L-色氨酸含量在0～150 mg/L浓度范围内线性关系良好，回归方程为A593nm=0.0053C-0.0007，相关系数为R2=0.9975，回收率为98.5％-99.0％。 2.对出发菌株谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum)FC22的形态特征和生理特性进行初步鉴定和分析，对该菌株的发酵培养基配方及发酵条件进行研究，确定了发酵过程中影响L-色氨酸积累的主要因素，从而为诱变育种的筛选工作做了准备。 3.以谷氨酸棒状杆菌FC22(Phe-+Tyramp;#39;+5MTR)为出发菌株，经紫外线(UV)、硫酸二乙酯(DES)逐级诱变处理，并采用磺胺胍(SG)、肉桂酸(CIN)作为抗性药物，通过摇瓶初筛和复筛、单菌落分纯以及连续传代试验测定，定向选育出一株遗传性状稳定的L-色氨酸高产菌株FC1013(Phe-+Tyr+5MTR+SGR+CINR)，在未经优化的发酵条件下摇瓶培养3天，平均可积累L-色氨酸8.91 g/L，比出发菌株FC22产量提高了120％。 4.研究了菌株FC1013的摇瓶分批发酵条件。采用正交设计试验法优化了种子培养基组成配比；采用响应面分析试验法优化了发酵培养基组成配比；采用单因素试验优化了发酵培养条件。在优化条件下，菌株FC1013摇瓶发酵72小时，平均可积累L-色氨酸9.79 g/L，比出发菌株FC22提高了141.7％。 正文内容 本文以谷氨酸棒杆菌FC22为出发菌株，对直接发酵法生产L-色氨酸进行了研究。主要研究内容和结果如下： 1.采用对二甲氨基苯甲醛比色法对发酵液中的L.色氨酸含量进行了定量分析。对比色法中影响L-色氨酸含量测定的因素进行了研究，并用单因素试验优化了实验条件，得出了对二甲氨基苯甲醛比色法测定L-色氨酸含量的最佳检测条件，从而建立了快速测定发酵液中L-色氨酸含量的方法。在最佳检测条件下，L-色氨酸含量在0～150 mg/L浓度范围内线性关系良好，回归方程为A593nm=0.0053C-0.0007，相关系数为R2=0.9975，回收率为98.5％-99.0％。 2.对出发菌株谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum)FC22的形态特征和生理特性进行初步鉴定和分析，对该菌株的发酵培养基配方及发酵条件进行研究，确定了发酵过程中影响L-色氨酸积累的主要因素，从而为诱变育种的筛选工作做了准备。 3.以谷氨酸棒状杆菌FC22(Phe-+Tyramp;#39;+5MTR)为出发菌株，经紫外线(UV)、硫酸二乙酯(DES)逐级诱变处理，并采用磺胺胍(SG)、肉桂酸(CIN)作为抗性药物，通过摇瓶初筛和复筛、单菌落分纯以及连续传代试验测定，定向选育出一株遗传性状稳定的L-色氨酸高产菌株FC1013(Phe-+Tyr+5MTR+SGR+CINR)，在未经优化的发酵条件下摇瓶培养3天，平均可积累L-色氨酸8.91 g/L，比出发菌株FC22产量提高了120％。 4.研究了菌株FC1013的摇瓶分批发酵条件。采用正交设计试验法优化了种子培养基组成配比；采用响应面分析试验法优化了发酵培养基组成配比；采用单因素试验优化了发酵培养条件。在优化条件下，菌株FC1013摇瓶发酵72小时，平均可积累L-色氨酸9.79 g/L，比出发菌株FC22提高了141.7％。 本文以谷氨酸棒杆菌FC22为出发菌株，对直接发酵法生产L-色氨酸进行了研究。主要研究内容和结果如下： 1.采用对二甲氨基苯甲醛比色法对发酵液中的L.色氨酸含量进行了定量分析。对比色法中影响L-色氨酸含量测定的因素进行了研究，并用单因素试验优化了实验条件，得出了对二甲氨基苯甲醛比色法测定L-色氨酸含量的最佳检测条件，从而建立了快速测定发酵液中L-色氨酸含量的方法。在最佳检测条件下，L-色氨酸含量在0～150 mg/L浓度范围内线性关系良好，回归方程为A593nm=0.0053C-0.0007，相关系数为R2=0.9975，回收率为98.5％-99.0％。 2.对出发菌株谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum)F