直接蒸馏法快速测定饲料蛋白质含量的研究.pdf

维普资讯 萎ct国e]~tLaAric．iitu1【r9a98~…,m3lica(2竺一二里 直接蒸馏法快速测定饲料 一 蛋 白质含量的研究 ’ 0， 崔淑文 马东霞 满 晨 王增力 徐若英 王学奎 (国家饲料质量检测 中心，北京 1000812‘中国农业科学院饲料研究所}湖北省农业科学院测试 中心) 目，．f7 提要 利 直接蔫馏法(directdistillation)原理，经研究改进而建立的快速测定玉米 豆粕、 菜籽饼、鱼粉、麸度、磐配台词糟、鸡配台饲料蛋 自质含量的新方法。3个实驻室对 7种类型 】42 个筒料产 品的研究结果表 明，本法与 国标法(凯 氏法)有很好 的相差性，两法测定值相对偏差均 达到国家标准规定的要袁。相关系数r一0．9745~0．9932，实验室间变异系数3 ，实验室内变 异系数2 。样 品不需消化过程 ，20rain可提供粗蛋 白质含量数据，比国标法具有快速 、能耗 低、节约试 、减少污染和操作筒便等优 点。 美蕾调 些 兰堑篮-鱼粉里全 兰 快速韭 直接蒸馏法 (简称DD法)是间接测定蛋白质的方法，原理是样品在强碱溶液中消煮，使 蛋白质中的不稳定氮素以氨的形式释放出来，在一定条件下，所释放的氨和样品中的含氮量 成正比且有很好的相关性。释放的氨被接收到硼酸溶液中，用标准盐酸滴定，测定样品中不 稳定氮素 ，然后用特定的回归方程计算样 品中蛋白质含量 。DD法首先由Kofranyi应用于奶 类蛋白质含量的测定 ]。Ronalds作了修改用于小麦和大麦的测定0]。Schmutz测定芥子蛋 白质含量收到较好的效果口] 曾秀英等建立快速测定水稻、小麦蛋白质含量的DD程序 ]， Lahmann等将DD法用于快速测定肉制品蛋白质含量 ]，测定结果与凯氏法有很好的相关 性。瑞典Tecator公司在蛋白质测定仪上建立了DD程序并进行小麦和大麦的测定 ]。目前 国内外尚未见DD法测定配合饲料和饲料原料蛋白质含量的报道 。 本试验对影响DD法测试结果的各种因素进行了系统研究，确立 了不同类型饲料样品 不稳定氮量与全氮量之间的回归方程，建立了测定猪、鸡配合饲料和 5种饲料原料(玉米、麸 皮、豆粕、菜籽饼、鱼粉)蛋白质含量的DD法，可在 20rain内提供蛋白质数据 。检测速度比国 标法提高 l2倍 。 1 材料与方法 1．1 材料 1．1．1 试验材料 玉米、猪配合饲料、鸡配合饲料、麸皮、菜籽饼、豆粕 (饼)、鱼粉 。 1．1．2 仪器设备 GC—N蒸馏装置(国家饲料质量检测中心提供)；自动滴定管 (或刻度滴 定管)，25ml；凯氏烧瓶，500ml 1．1．3 试剂溶液 (除注明者外均为分析纯) 40 氢氧化钠水溶液 (w／v)；10％氯化钡水溶 液 (w／v)；2 硼酸水溶液 (w／v)；0．1000mol／L盐酸标准溶液 (需要标定)；混合指示剂 ： 收稿 日期 1996—11—27 八五 国家科技攻关课题资助。 维普资讯 84 中 国 农 业 科 学 31卷 0．1 甲基红乙醇溶液，0．5 溴 甲酚绿乙醇溶液，两溶液等体积混合。 1．2 方法 1．2．1 样品制备 取具有代表性试样，粉碎，全部通过40目筛充分混匀后，装瓶备用。 1．2．2 测定步骤 (1)称样：称取试样 (玉米、麸皮、猪配合饲料、鸡配合饲料各 5g；菜籽饼、豆粕、鱼粉各 2g)，精确至 0．001g于 500ml凯氏烧瓶中，加 50ml蒸馏水(边摇边加)，充分混合。 (2)蒸馏：向凯氏烧瓶中加 25ml10 氯化钡溶液，振摇，再加 80ml40 氢氧化钠溶液， 立即连接蒸馏装置，蒸馏装置冷凝管的末端浸入盛有 50ml2 硼酸溶液和 2滴混合指示剂 的锥形瓶中，轻摇凯氏烧瓶，使溶液混匀，然后加热蒸馏 待馏出液体积达 100ml时(总体积 150rod，停止蒸馏 。 (3)滴定：用 0．1000mol／L盐