内脏脂肪素和血管内皮生长因子在早期糖尿病大鼠视网膜中的表达及意义.pdf

·45· 旦笙!塞坠腿型苤查!!!!生!旦筮!!鲞箜!塑鱼!i!!垦!e竺P!尘!!竺!!＆!!!!!!!!!!!!!：!!!堕!：! 实验研究· 内脏脂肪素和血管内皮生长因子在早期糖尿病 大鼠视网膜中的表达及意义 路强 杨晓静 崔巍 高伟 【摘要】 背景糖尿病视网膜病变(DR)是糖尿病主要的微血管并发症之一，已成为糖尿病患者致盲的 首要原因。新生血管形成是DR的主要病理表现，但其作用机制不明，对其发病机制的探讨有助于为DR的 早期治疗提供潜在靶点。 目的观察内脏脂肪素(visfatin)和血管内皮生长因子(VEGF)在糖尿病大鼠视网 方法 膜甲的表达和分布特点，探讨visfatin和VEGF在DR发生发展过程中的作用机制。将60只雄性SPF 级sD大鼠按随机数字表法分为糖尿病组和对照组，糖尿病组大鼠腹腔内一次性注射链脲佐菌素(STZ) 60 ml／100 mg／kg(0．60 g)诱导糖尿病大鼠模型，血糖≥16．7mmol／L为造模成功，对照组以同样的方法注射等 体积柠檬酸钠缓冲液。于模型建立后12周处死大鼠并提取视网膜组织，采用免疫荧光法和Westernblot法分 结果 别从形态学和分子生物学水平观察和检测visfatin和VEGF在视网膜中的表达。造模后12周糖尿病 差异有统计学意义(t=11．778，P=0．000)。免疫荧光双标法检测显示，对照组大鼠视网膜中visfatin和VEGF 主要在视网膜神经纤维层和星形胶质细胞中呈少量表达，但在早期糖尿病大鼠视网膜全层中可见visfatin及 VEGF强阳性染色，且二者呈共表达。Westernblot检测显示，造模后12周糖尿病大鼠视网膜中visfatin表达 糖尿病组大鼠视网膜中VEGF蛋白表达量(A值)为415．88_+92．15，明显高于对照组大鼠的113．06±32．06，差 异有统计学意义(t=10．067，P=0．000)。结论 早期糖尿病大鼠视网膜中visfatin呈高表达，提示visfatin在 DR发生发展过程中可能起关键作用，其机制可能与局部高糖低氧诱导Miiller细胞分泌产生，进而上调VEGF 的表达有关。 【关键词】 内脏脂肪素；血管内皮生长因子；糖尿病视网膜病变；免疫荧光双标法；免疫印迹法 Concomitant andcombinedlocalizationofvisfatinandvascularendotheliaIfactorin expression growth retinasofdiabeticratsLU Qiang，YANGXiao-jing，CUI耽i，GAO乳i．DepartmentofOphthalmology，Inner AutonomousRenmin 01001 Mongolia Region Hospital，Hohhot7，China author：CUIWei，Emaif：cuiweil957yanke@163．con Corresponding Diabetic oneof themost microvascular [Abstract]Background retinopathy(DR)isimportant ofdiabetes．whichhasbecomeoneofthe causesofblindness．NeovascularizationiSthemain complications leading mechanismisunknown．Thereisa