GB/T 9695.26-1991肉与肉制品　维生素A　含量测定.pdf

中华人民共和国国家标准 肉与肉制品 维生素A含盘测定 GB/T 9695.26一91 Meat and meat products-Method for de傲 er min皿Non of vitamin A content 1主肠内容与适用范围 本标准规定了肉和肉制品中维生素A含量的测定方法。 本标准适用于肉和肉制品中维生素A含量的测定。 2引用标准 GB 9695. 19肉与肉制品 取样方法 3 原理 样品皂化后，用石油醚提取不皂化的维生素A，浓缩后、用高效液相色谱荧光检测器.激发波长340 nm，发射波长460 nm，分离测定维生素A，用标准外标法计算样品中维生素A的含量。 4 试剂 除特别标明外所用试剂全为分析纯，所用水应为蒸馏水或同等纯度的水。 4. 1 氢氧化钾(GB 2306):50%溶液; 4.2 抗坏血酸:10 YO溶液; 4. 3 无水乙醉(GB 678); 4.4 石油醚:沸程30-60-C; 4. 5 无水硫酸钠; 4.6 异丙醉; 4.7 甲醉(GB 683):重蒸后使用; 4.8 维生素A标准溶液:0. 2 mg/mL 称取维生素A标准品10. 0 mg，用异丙醉溶解，移至50 mL棕色容量瓶中，用异丙醉稀至刻度。当天 配制。 5仪器和设备 5.1实验室常规设备; 5.2绞肉机:孔径不超过4 mm; 5.3旋转蒸发器; 5.4液相色谱仪，带荧光检测器; 5.5色谱柱:十八烷基键合固定相柱或其他能分离维生素A的柱子。 国家技术监督局1991一03一26批准 1991一12一01实施 / / / GB/T 9695.26一91 6 试样 6. 1按GB 9695.19取样 6.2取有代表性的试样200 g，于绞肉机中至少纹两次使其混匀，试样应尽快分析。 分析步骇 7. 1 皂化 维生素A易被光破坏，试验应避光操作。 称取。.5-5 g试样于150 mL棕色皂化瓶中，加人10%抗坏血酸溶液5 mL,500a氢氧化钾溶液 mL，乙醉30 mL混匀，于80℃水浴上回流加热30^-60 min，使试样溶液清撤，完全皂化后于流水中冷 15too 了.2 提取 将皂化后的试样溶液移入125 mL分液漏斗中，用30 mL石油醚分数次洗皂化瓶，洗液并入分液漏 斗中，塞上塞子，轻摇分液漏斗，避免乳化。静置，待分层后，将水层放入第二个分液漏斗中，醚层留在第 一个分液漏斗中。于第二个分液漏斗中倒人10 mL石油醚，进行第二次提取，如此进行3^-4次，石油醚 层并入第一个分液漏斗中 石油醚层反复用水洗涤，直至水层不呈碱性(用PH试纸检查)为止，弃去水层。将分液漏斗中石油 醚层经过无水硫酸钠脱水，撼入干燥的棕色圆底烧瓶中。再用石油醚洗涤无水硫酸钠和分液漏斗，洗液 并入棕色圆底烧瓶中。 7.3分析试样的准备 将盛有石油醚提取液的圆底烧瓶与旋转蒸发器连接，于50^-60℃水浴上减压回收石油醚，待瓶内 只剩约l-2 mL液体时，取下烧瓶，用氮气吹干剩余液体，立即加入2.0mL异丙醉溶液，摇匀，溶解瓶中 维生素A，塞上塞子.以防溶剂挥发，此为色谱分析样液。 7.4 测定 7.4.1维生素A标准曲线的绘制 取维生素A标准溶液1,2,3,4,5,6,7,