GB/T 9695.28-1991肉与肉制品　维生素B2含量测定.pdf

中华人民共和国国家标准 肉与肉制品 维生素B2含量测定 GB/T 9695.28一91 Meat and meat products-Method for determination of vitamin B2 content 1主要内容与适用范围 本标准规定了肉与肉制品中维生素B:的测定方法。 本标准适用于肉与肉制品中维生素B:含量的测定。 2引用标准 GB 9695. 19肉与肉制品 取样方法 3 原理 试样用稀酸经121-123℃高压釜处理，提取维生素B2(核黄素)，维生素B:在中性或酸性溶液中经 照射产生蓝色荧光，荧光强度与维生素B:的浓度成正比，以此测定维生素B2的含量。 4试剂 4. 1盐酸(GB 622):0. 1 mol/L溶液; 4.2氢氧化钠(GB 629):l m01/1,溶液; 4.3冰乙酸(GB 676):0.02 mol/L溶液; 4.4冰乙酸(GB 676); 4. 5高锰酸钾(GB 643):4写溶液; 4.6 3%过氧化氢(GB 6684):3%溶液; 4. 7连二亚硫酸钠; 4.8维生素B:标准溶液 4. B. 1标准贮备液100 ug/mL: 将50. 0 mg维生素B。标准品溶于0. 02 mol/L乙酸溶液中并定容至500 ml,棕色容量瓶中。(可在水 浴上加热溶解，冷却后再定容。) 4. 8. 2标准工作液0. 05 pg/mL: 吸取标准贮备液1. 00 mL于100 ml,棕色容量瓶中定容、摇匀。吸取此液5. 00 mL于100 mL棕色容 量瓶中用水定容、摇匀，用时现配。 5仪器和设备 5.1 实验室常用设备; 5.2 绞肉机:孔径不超过4 5. 3 高压釜:温度可控制在121-123-C; 5.4 荧光分光光度计。 国家技术监督局1991一03-26批准 1991一12一01实施 / / / GB/T 9695.28一91 6试样 6.1按GB 9695.19取样。 6. 2取有代表性的试样200 g，于绞肉机中至少绞两次使其混匀，贮于密闭容器中备用。 了 分析步骤 了.飞试样前处理 称取5g(精确到。001 g)试样于250 mL具塞锥形瓶中，加入0. 1 mol/L盐酸溶液10 mL，塞好瓶盖 用力振摇，使试样与酸混匀，再用0. 1 mol/L盐酸溶液冲洗瓶壁，总体积约为60 mL。将锥形瓶放入121 一1230C高压釜中加热30 min，取出冷却至室温。用1 mol/L氢氧化钠溶液调pH为4.0-4.5(用精密pH 试纸检查)使蛋白质沉淀。将其全部转移到500 mL棕色容量瓶中定容、摇匀‘过滤，滤液避光备用。 了.2 测定 吸取备用滤液，维生素B2标准工作液各10. 00 mL分别加入25 mL棕色试管中，加入冰乙酸1 mL. 在不断摇动下加4%高锰酸钾溶液4滴，使溶液显紫色，静置2 min。然后再滴加3%过氧化氢溶液2滴， 摇匀使紫色在10s内退去。在激发波长440 nm，发射波长565 nn处测定其荧光强度I和I在各试管中 分别加入连二亚硫酸钠20 mg，轻摇，JOs内测其最小荧光强度Q和Q,。 8分析结果的计算 计算公式: 1一Q C x 500 x 10-3