第六章细菌、病毒总结.ppt

（3）噬菌体的基因重组与作图： 　　　通过双重感染→ 两种噬菌体进行杂交→重组的噬菌斑→ 两基因之间的遗传距离。 3．细菌遗传分析中的基因转移： 性导 转导 如果细菌的两个基因之间距离大于噬菌体的染色体长度，一般不能同时进行转导，除非携带不同基因颗粒同时感染同一细菌细胞。 频率： 10-5 ×10-5=10-10 共转导或并发转导（cotransduction）：两个基因同时转导的现象。 如果两个基因始终是一起转导或同时转导频率较高，那么可以证明这两个基因是连锁的。两个基因共转导频率愈高，表明两个基因连锁愈紧密，相反，共转导频率愈低，则表明这两个基因距离愈远。 双因子转导（two-factor transduction）：每次观察两个基因的转导，通过每两个基因之间的共转导频率可以确定这些基因在染色体上的次序。 若要分析３个基因则需做３次双因子转导实验，才能确定这３个基因的次序。 假定这３次实验结果为：①a基因和b基因共转导的频率高；②a基因和c基因共转导频率也高；③ b和c基因的共转导频率很低，那么这３个基因的次序就应为b、a、c。 三因子转导（three-factor transduction ）分析，则只做一次实验就可推出３个基因的次序。 以普遍性转导噬菌体P1为例，测定大肠杆菌的leu（亮氨酸合成)、thr（苏氨酸合成）、azi(叠氮化钠抗性）三个基因的顺序。 每个选择的标记基因进行多次试验： 三个位点之间的连锁关系： 实验1： 2种可能排列： azi　leu　　　　　　 thr √ 　 leu　azi　　　　thr 实验2：肯定三个基因的顺序是： azi　leu　　　　　　thr 实验3： 　证明这一顺序，因为leu+和thr+片段之间从未携带有azir。 实验 选择的标记基因　 未选择的标记基因频率 1 2 3 　leu+ 　thr+　 　 leu+ thr+ 50%azir 2%thr+ 3% leu+ 0%azir 　0%azir 通过合转导关系求出两基因之间的物理距离： d=同一染色体上两基因之间的物理距离； L=转导DNA的平均长度； X=两个基因共转导的频率。 由以上公式可知： 　　转导DNA的平均长度约为１个病毒基因组的大小； 通过试验测知两个基因的合转导频率，就可估算出两个 基因间的物理距离。 通过3因子转导可以得到不同类型的转导子及其频率，显然频率最低的一类转导子是最难于转导的，因为它的产生需要同时发生的交换次数最多。这种转导子的3个基因中，两边的应为供体基因，中间的受体基因。 例如：大肠杆菌leu+arg+met+细胞作供体， leu-arg-met-作为受体，由P1噬菌体作为载体进行转导。最初选择的是leu+转导子，然后检查leu+转导子中其他两个基因被转导的情况，得到的转导子类型和数目如下： (1) leu+ arg- met- 453 (2) leu+ arg+ met- 114 (3) leu+ arg+ met+ 36 (4) leu+ arg- met+ 0 603 Incorporation of a late marker into the F－ E.coli chromosome 可见： ①第四类基因型的转导子是很难发生的，由此类转导子基因型可以看出这三个基因的排列次序是leu arg met； ② leu+和arg+在第二、三类转导子中是共转导，而在第一、四类转导子中不是共转导，所以这两个基因共转导频率为（36+114）/603=0.25； ③leu+和met+仅在第三类转导子中共转导，所以共转导频率为36/603=0.06。 如果两个基因紧密连锁，它们就有可能经常在一起转导，共转导频率将接近1。如果两个基因从未或几乎未包含在同一转导的DNA片段中，那么它们的共转导频率接近于或等于0。 利用转导作图也和转化作图一样，最好在中断