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蜂胶中紫檀芪含量检测方法-高效液相色谱法

1范围

本标准规定了蜂胶中紫檀芪含量检测方法—高效液相色谱法。本标准适用于蜂胶中紫檀芪含量的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T19427蜂胶中12种酚类化合物含量的测定液相色谱-串联质谱法和液相色谱法

GB/T24283蜂胶

3原理

紫檀芪通过PgrandsilC18色谱柱色谱柱，在一定条件下，利用外标法对其中紫檀芪进行定量测定。

4试剂和材料

4.1紫檀芪标准品：≥98%

4.2甲醇：色谱纯，0.45μm过滤；

4.3蒸馏水

5仪器

5.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器；

5.2注射过滤器：容积为20μL，并带有0.45μm有机过滤膜；

5.3微量注射器：100μL。

6分析步骤

6.1标准溶液的制备：

精密称取紫檀芪标准品2.0mg于10ml容量瓶中，蒸馏水定容，摇匀0.45μm膜过滤备

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用。

6.2样品溶液的制备：

精密称取紫檀芪样品0.2g于10ml容量瓶中，用蒸馏水定容，摇匀0.45μm膜过滤待测。6.3.测定：

6.3.1液相色谱条件

a)色谱柱：PgrandsilC18250*4.6mm,5μm,

b)流动相：甲醇+水=70+30

c)流速：0.8ml/min

d)检测波长：305nm

e)进样量：10μl

f)柱温：30℃

g)压力上限：3000

6.3.2测定：

6.3.3标准品在上述色谱条件下，将标品溶液进样10ul进行色谱分析，得到标样图（见图1）。

6.3.4样品溶液的测定：在同一色谱条件下，取10ul样品溶液进行色谱分析，得到样品谱图（见图2）。以相应峰面积或峰高标准品色谱上求出含量。

6.3.5结果计算：

×100

式中：X--紫檀芪样品中紫檀芪的含量，单位（%）

A--样品溶液对应的峰面积或峰高C--样品质量，单位（mg）

B--紫檀芪标品溶液对应的峰面积或峰高D--紫檀芪标准品质量，单位（mg/ml）

注：每个样品做两个平行样，检测结果保留三位有效数字，在重复条件下获得的两次独立测定结果绝对偏差不得超过算术平均值的10%。

6.3.6紫檀芪标准色谱图：见图1。

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图1紫檀芪标准品色谱图

备注：标液浓度为0.2mg/ml，参考出峰时间为14.267min。

6.3.7紫檀芪样品紫檀芪色谱图：见图2

图2紫檀芪样品色谱图