HPLC法高效液相色谱仪的保养.pptx

河南省三门峡市湖滨区食品卫生监督检验所 王建华 2003/02 E-mail:jianhua-wang@ (由中国色谱网()提供下载);HPLC的环境设置： HPLC的日常操作条件：温度：10～30℃； 相对湿度80％； 最好是恒温、恒湿，远离 高电磁干扰、高振动设备，有良好的通风设 施。;HPLC用水可以通过以下几个方面来得 到：;?;HPLC六通阀进样器的使用及保养;工作原理; 虽然六通阀进样器具有结构简单、使用 方便、寿命长、日常无需维修等特点，但正 确的使用和维护将能增加使用寿命，保护周 边设备，同时增加分析准确度。如使用得当 的话，六通阀进样器一般可连续进样3万次而 无需维修。; 手柄处于Load和Inject之间时，由于暂时 堵住了流路，流路中压力骤增，再转到进样位， 过高的压力在柱头上引起损坏，所以应尽快转动 阀，不能停留在中途。在HPLC系统中使用的注射 器针头有别于气相色谱，是平头注射器。一方面， 针头外侧紧贴进样器密封管内侧，密封性能好， 不漏液，不引入空气；另一方面，也防止了针头 刺坏密封组件及定子。; 六通阀进样器的进样方式有部分装液法和 完全装液法两种。使用部分装液法进样时，进 样量最多为定量环体积的75％，如20μl的定量 环最多进样15μl的样品，并且要求每次进样体 积准确、相同；使用完全装液法进样时，进样 量最少为定量环体积的3至5倍，即20μl的定量 环最少进样60至100μl的样品，这样才能完全 置换样品定量环内残留的溶液，达到所要求的 精密度及重现性。推荐采用100ul的平头进样针 配合20ul满环进样。; 可根据进样体积的需要自已制作定量环， 一般不要求精确计算定量环的体积，譬如，一根 名义上10μl的定量环，实际是9μl还是1lμl并 不重要，因为被测样品和校正样品的进样体积保 持一致，在计算结果时误差都被抵消了。;进样样品要求无微粒和能阻死针头及进样 阀的物质，样品溶液均要用0．45μm的滤膜过滤。 防止微粒阻塞进样阀和减少对进样阀的磨损。为 防止缓冲盐和其它残留物质留在进样系统中，每 次结束后应冲洗进样器，通常用不含盐的稀释剂、 水或不含盐的流动相冲洗，在进样阀的Load和 Inject位置反复冲洗，再用???纤维纸擦净注射器 针头的外侧。;泵的保养：;柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动； 当柱子和色谱仪联结时，阀件或管路一定要清洗干净； 要注意流动相的脱气； 避免使用高粘度的溶剂作为流动相； 进样样品要提纯； 严格控制进样量； 每天分析工作结束后，要清洗进样阀中残留的样品； 每天分析测定结束后，都要用适当的溶剂来清洗柱； 若分析柱长期不使用，应用适当有机溶剂保存并封闭；;紫外灯的保养：;河南省三门峡市湖滨区食品卫生监督检验所 王建华 2003/02 0398-2862986；2860041 E-mail:jianhua-wang@ (由中国色谱网()提供下载);HPLC的环境设置： HPLC的日常操作条件：温度：10～30℃； 相对湿度80％； 最好是恒温、恒湿，远离 高电磁干扰、高振动设备，有良好的通风设 施。;HPLC用水可以通过以下几个方面来得 到：;?;HPLC六通阀进样器的使用及保养;工作原理; 虽然六通阀进样器具有结构简单、使用 方便、寿命长、日常无需维修等特点，但正 确的使用和维护将能增加使用寿命，保护周 边设备，同时增加分析准确度。如使用得当 的话，六通阀进样器一般可连续进样3万次而 无需维修。; 手柄处于Load和Inject之间时，由于暂时 堵住了流路，流路中压力骤增，再转到进样位， 过高的压力在柱头上引起损坏，所以应尽快转动 阀，不能停留在中途。在HPLC系统中使用的注射 器针头有别于气相色谱，是平头注射器。一方面， 针头外侧紧贴进样器密封管内侧，密封性能好， 不漏液，不引入空气；另一方面，也防止了针头 刺坏密封组件及定子。; 六通阀进样器的进样方式有部分装液法和 完全装液法两种。使用部分装液法进样时，进 样量最多为定量环体积的75％，如20μl的定量 环最多进样15μl的样品，并且要求每次进样体 积准确、相同；使用完全装液法进样时，进样 量最少为定量环体积的3至5倍，即20μl的定量 环最少进样60至100μl的样品，这样才能完全 置换样品定量环内残留的溶液，达到所要求的 精密度及重现性。推荐采用100ul的平头进样针 配合20ul满环进样。; 可根据进样体积的需要自已制作定量环， 一般不要求精确计算定量环的体积，譬如，一根 名义上10μl的定量环，实际是9μl还是1lμl并 不重要，因为被测样品和校正样品的进样体积保 持一致，在计算结果时误差都被抵消了。;进样样品要求无微粒和能阻死针头及进样 阀的物质，样品溶液均要用0．4