基因工程考试.doc

基因工程：按照人们的的愿望，进行严密的设计，通过体外DNA重组和转基因等技术，有目的地改造生物种性，使现有的物种在较短时间内趋于完善，创造出更符合人们需求的心的生物类型，这就是基因工程。又称重组DNA技术或遗传工程。 核酶：是具有催化功能的RNA分子，是生物催化剂，可降解特异的mRNA序列。核酶又称核酸类酶、酶RNA、?核酶类酶RNA。 插入失活：当外源DNA插入到载体的某一基因中间时，该基因就不能表达，这种现象称为插入失活。 结构基因：包括以5端mRNA转录位点开始到3端mRNA终止信号结束的全部功能单位。 目的基因：决定生物的优良性状，具有应用价值的应用前景，并被用于构建物种新特性的基因。 操纵子：功能密切相关的基因聚集在一起，处于同一转录启动的调控之下，并且有相同的转录终止区。 启动区：RNA聚合酶识别，结合和开始转录的一段DNA序列。 终止子：原核生物基因在转录终止前的一段提供转录终止信号的DNA序列。 终止因子：帮助RNA聚合酶识别终止信号的辅助因子。 双元载体：即能在宿主自我复制，又能转化感染其它宿主的载体。 穿梭载体：含有细菌质粒和克隆的真核生物DNA片段的杂种质粒，有两个复制起点和既能在细菌又能在真核细胞中进行选择的选择标记，很容易从一宿主转到另一个宿主(来回穿梭） 载体的分类：按载体的来源分：质粒载体、噬菌体载体、粘粒载体、植物病毒载体、动物病毒载体、人工染色体等。按用途分：克隆载体：主要用于扩增或保存DNA片段，是最简单的载体，其上有复制子即可。表达载体：用于一个基因的蛋白表达，是在常规载体的基础上衍生而来，这类载体既有复制子，更要有强启动子。穿梭载体：含有两个不同的复制子，能在两类不同的受体细胞中复制。 人工染色体载体：利用染色体的复制元件来驱动外源DNA片段复制的载体。其装载外源DNA片段的容量可以与染色体的大小媲美 温和噬菌体：λDNA可以整合到宿主细胞染色体，以溶源状态存在并随染色体的复制而复制。 插入型载体：当外源DNA片段插入后使载体所具有的合成活性阻遏物的功能遭受破坏，而不能进入溶菌周期。 质粒载体的特性：独立于染色体外的，能自主复制且稳定遗传的双链共价闭合的环状DNA分子，依赖宿主细胞的存在 表达序列标签：EST是从一个随机选择的cDNA 克隆进行5’端和3’端单一次测序获得的短的cDNA 部分序列，代表一个完整基因的一小部分，在数据库中其长度一般从20 到7000bp 不等，平均长度为360 ±120bp。EST 来源于一定环境下一个组织总mRNA 所构建的cDNA 文库，因此EST也能说明该组织中各基因的表达水平。 用它分离所需要的目的基因，这种保存基因遗传信息的材料称为基因文库。 移动基因：能从染色体的一个位置转移到另外一个位置，甚至在不同的染色体之间跳跃的基因。 断裂基因：基因内部插入有与氨基酸编码无关的DNA间隔区，使一个基因分隔成不连续的若干片段。 重叠基因：两个基因内部存在重叠的读码框。 限制性核酸内切酶：是由细菌产生的一类能特异识别双链DNA中的特定碱基序列，并在识别位点切割磷酸二酯键的核酸内切酶(简称限制酶)。 DNA连接酶：能催化双链DNA片段靠在一起的3′羟基末端和5′端磷酸基团末端之间形成的磷酸二酯键，使两末端连接的一种核酸酶。? DNA聚合酶：作用是指在引物和模板的存在下，把脱氧核糖核苷酸（dNTP）连续地加到引物链的?3’–OH?末端，催化核苷酸的聚合作用 同裂酶：来源不同，识别位点和切割位点均相同的限制性内切酶。即同裂酶产生同样的切割，形成同样的末端。同裂酶对识别序列的甲基化状态有不同的限制性反应。同尾酶：来源不同，识别序列也不相同，但切出的DNA片段具有相同的末端序列。同位酶：识别序列相同，但切割位点不同 引物：是人工合成的与模板DNA互补的寡核苷酸序列。 基因文库：是指将某种生物的全部基因组的遗传信息贮存在可以长期保存的稳定的重组体中，以备需要时能够随时应 基因组文库：将某个生物的全部基因组DNA切割成一定长度的DNA片段克隆到某种载体上，贮存在一个受体菌的群体之中形成的集合。 cDNA：与RNA链互补的单链DNA，以其RNA为模板，在适当引物的存在下，由RNA与DNA进行一定条件下合成 cDNA文库：是指将某种生物体基因组转录的全部mRNA经反转录产生的cDNA片段分别与克隆载体重组，储存于某种受体菌中，该群体就称该生物基因组的cDNA文库。 载体：指基因工程中携带外源基因进入受体细胞的“运载工具”，它的本质是DNA复制子。 多克隆位点：载体上具有一种或多种单一限制性内切酶位点，且在此位点上插入外源基因片段不影响本身的复制功能。 转化：指将质粒或其他外源DNA导入处于感受态的宿主菌，并使其获得新的表型的过程。? 转染：指感受态的受体细胞捕获和表达以噬菌体为