重组大肠杆菌合成光学纯L-苯基乳酸.PDF

※生物工程 食品科学 2017, Vol.38, No.02 59 L 重组大肠杆菌合成光学纯 -苯基乳酸 1 1 1 1,2 1 1,* 朱益波 ，鲁如彬，程 俊 ，王 颖 ，齐 斌 ，王立梅 （1.常熟理工学院生物与食品工程学院，江苏 苏州 215500 ；2.吉林农业大学食品科学与工程学院，吉林 长春 130118 ） 摘  要： Z2013513 DNA PCR L- ldhL 以巨大芽孢杆菌 基因组 为模板，分别 扩增得到 乳酸脱氢酶基因（ ）和葡萄糖脱氢 gdh gdh ldhL pETDuet pETDuet-ldhL-gdh 酶基因（ ），将 与 分别连接至表达载体 ，获得共表达质粒 。经转化和验证获 BL21 DE3 /pETDuet-ldhL-gdh - 得重组菌大肠杆菌 （ ） 。十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳和比酶活力分析表明重 L- 37 ℃、200 r/min条件下，经60 min反应，催化底 组蛋白 乳酸脱氢酶和葡萄糖脱氢酶均成功表达且具有酶活力。在 / 24.26 mmol L L- L- 99% 59.55% 物苯丙酮酸合成 苯基乳酸。产物 苯基乳酸光学纯度（＞ ），底物摩尔转化率（ ），结 L- 果表明此重组体系可用于高效合成高光学纯 苯基乳酸。 L-2- -3- Z2013513 L- NADH 关键词： 羟基 苯基丙酸；巨大芽孢杆菌 ； 乳酸脱氢酶；葡萄糖脱氢酶； 再生；全细胞催化 Production of Optically Pure L-Phenyllactic Acid by Using Whole Cells of Recombinant Escherichia coli 1 1 1 1,2 1 1,* ZHU Yibo , LU Rubin , CHENG Jun , WANG Ying , QI Bin , WANG Limei (1. School of Biotechnology and Food Engineering, Changshu Institute of T