铁观音茶多糖的酶法提取及脱蛋白工艺研究.docx

铁观音茶多糖的酶法提取及脱蛋白工艺研究何传波吴兰兰汤凤霞熊何健(集美大学生物工程学院,福建厦门361021)摘要采用纤维素酶水解方法提取铁观音茶多糖,并对其脱蛋白工艺进行了研究.酶法提取的正交实验结果表明,铁观音茶多糖的得率随酶用量和水解时间的增加而增大,随pH值和温度的升高先增后降,最佳的酶处理条件为:加酶量15mg/g,pH=4.0,水解温度45℃以及水解时间90min.比较了Sevag法、三氯醋酸法以及酶与三氯醋酸结合法对铁观音茶多糖的脱蛋白效果,结果表明,三氯醋酸法可以简单高效地去除蛋白质,而又不会造成多糖过多损失,4mol/L三氯醋酸溶液的最佳使用量为2%(v/v).关键词铁观音茶;多糖;纤维素酶;提取;脱蛋白【中图分类号】Q538【文献标识码】A【文章编号】1672—8513(2009)01-0041-04AStudyontheEnzymaticExtractionandtheRemovalofProteinfromTieh2Kwan2YinPolysaccharidesHeChuanboWuLanlanTangFengxiaXiongHejian(SchoolofBioengineering,JimeiUniversity,Xiamen361021,China)Abstract:Thepolysaccharideshavebeenextractedfromtieh2kwan2yinwiththepretreatmentofcellulase,andtheprocessfortheremovalofproteinhasbeendiscussed.Theresultsoftheorthogonalexperimenthaveshowedthattheyieldofcrudepolysaccharideshasincreasedwiththeamountofcellulaseandhydrolysistime.However,whenpHandtemperatureincreases,theyieldfirstincreasesandthendecreases.Theproperconditionsaregivenasfol2lows:theamountofcellulaseisabout15mg/g,thepHisabout410,thehydrolysistemperatureisabout45℃,andthehydrolysistimeisabout90min.Threemethodsfortheremovalofproteinhavebeendiscussed,andthere2sultshaveshowedthatthetrichloroaceticacid(TCA)hasexhibitedahigherremovalpercentageofproteinandalowerlossofpolysaccharide.TheproperconcentrationofTCA(4M)is2%(v/v).Keywords:tieh2kwan2yin;polysaccharides;cellulase;extraction;removalofprotein以铁观音茶最为出名,目前市场上中低档茶严重滞销,在茶叶加工过程中也有大量的枝叶和灰末等副产品未被利用,若从其中提取茶多糖作为保健食品的功能因子,则可变废为宝,为中低档茶的综合利用开辟一条新途径.一般植物细胞外包围着一层由纤维素、角质等物质构成的壁,它对物理的、化学的和酶的降解都有相当强的抵抗能力,是细胞内多糖等大分子溶出的主要屏障.目前采用的破坏方法通常有机械破壁法、酶法和微生物法,酶工程技术是近几年来用于天然0引言茶作为当今世界三大饮料之一越来越受到人们的欢迎,茶叶对人体的保健功能早为古今医学家所肯定,在中国及日本民间很早就有利用粗老茶治疗糖尿病的经验.20世纪90年代初,日本学者清水岑夫认为茶叶中治疗糖尿病的药理成分为茶叶多糖,此后有关茶叶多糖的研究报道逐年增多[1],现代医学研究表明,茶多糖具有抗血栓、降血糖、增强机体免疫能力等多种活性[2-4].福建是一个产茶大省,尤3收稿日期:2008-09-03.基金项目:集美大学科研预研基金资助项目(ZQ2006025).作者简介:何传波(1978～),男,博士,讲师,主要研究方向:多糖物质及其综合利用.41云南民族大学学报(自然科学版)第18卷(mg/mL),V———脱蛋白后的样品液体积(mL).1.2.3脱蛋白率的计算蛋白质含量的测定:考马斯亮蓝法,脱蛋白率的计算:植物有效成分提取的一项生物工程技术,选用恰当的酶,可较温和地将植物组织分解,加速有效成分的释放,从而提高其提取率.本文用纤维素酶处理铁观音茶,通过正交实验优