铬革屑的酶法提取蛋白质新工艺.pdf

维普资讯 2003年 10月 西北大学学报 (自然科学版) 0ct．2003 第 33卷第 5期 JournalofNorthwestUniversity(NaturalScienceEdition) Vo1．33No．5 铬革屑 的酶法提取蛋 白质新工艺 张小燕h ，范晓东 ，王晓刚 ，张 勤 ，杨德玉。 (1．西北工业大学 化学工程系 ，陕西 西安 710072；2．西北大学 化工学 院；3．西北大学 化学系 ，陕西 西安 710069) 摘要 ：研究了用碱性和 中性蛋 白酶水解铬革屑以提取蛋 白质的新工艺。对前处理方法的选择和影响 酶作用的各种 因素进行 了试验 ，得到的工艺条件如下 ：用 CaO进行前处理 ，再用碱性和 中性蛋 白酶 的协 同作用进行酶解，将水解液进行过滤后经过脱铬和浓缩干燥 ，得到 了铬含量为 l0．1p．g／g、粗 蛋 白含量达 82．1 的水解蛋 白，铬革屑蛋 白质的回收率为 60．7 。 关 键 词 ：铬革屑 ；蛋 白质；酶解 中图分类号 ：Q516 文献标识码 ：A 文章编号 ：1000—274X(2003)05—0550—04 铬革屑是制革工业产生 的大量工业废料 ，其主 1．2 实验方法与步骤 要成分是胶原蛋 白、三价铬盐 ，以及其他一些盐类和 1．2．1 主要分析方法[4 可溶性蛋 白质 的测定方 杂质 [1q]。由于铬革屑的胶原蛋 白含量高 ，并且含有 法 GB／T 6432—1994双缩 脲法 ；蛋 白酶 酶活力 的测 较高浓度的铬 ，所 以对它 的回收利用进行 了很多 的 定方法 QB 1805．3—93，GB／T 17811—1999；总氮测定 研究 ，目前 比较成熟 的是应用碱法从铬革屑 中提取 为凯 氏定氮法 。 水解蛋白以及回收三价铬盐。但是 ，作为一种反应条 1．2．2 实验 步骤 件较为强烈的化学方法 ，碱法不可避免地存在着一 些难 以克服的弊端 。本文试图通过在铬革屑 的回收 匝 圈 利用过程 中引入酶制剂，期望可 以克服碱法之弊端 ， 回 同时也为蛋 白酶应用提供一些参考 。 图 1 工艺流程简 图 1 实 验 Fig．1 Graphofthetechnologyprocess 1．1 试剂与仪器 2 结果与讨论 铬革屑 (中国人民解放军第 3513厂提供 ，经干 燥)；酪氨酸 (上海第二军医大学政翔化学试剂研究 2．1 前处理方法的选择 室)；中性蛋 白酶 (无锡酶制剂厂 ，标识酶活力 50000 初步试验表明，由于铬革屑的结构稳定，很难被 U／g)；碱 性 蛋 白酶 (无锡酶制剂厂 ，标识酶活力 蛋白酶水解 ，必须经过一定 的前处理 ，结合铬革屑 回 100000U／g)；酪蛋白(中国医药集团上海化学试剂 收利用方面的文献报道 ，本 实验采取碱法进 行前处 公司)；三氯 乙酸 (分析纯)；其余试剂均为市购 国产 理工艺 ，用氧化钙作为处理剂。 分析纯 ；722光栅分光光度计 (上海第三分析仪器 氧化钙 的加入对于铬革屑是一个物理和化学作 厂)；TU一1901型紫外可见分光光度计 (北京普析通 用过程。一方面 ，在碱性条件下，铬革屑胶原中的次 用仪器有 限责任公司)}PHS一3C型精密 pH计 ，上海 级键 以及铬和胶原形成 的配位键 容易遭到破坏 ，而 雷磁仪器厂 ；微量凯 氏定氮仪 (自制)。 使铬革屑的化学结构变得不稳定 。同时，在碱性条件