04 第四章 植物组织培养技术(三).pptx

第四节 无病毒植株培育;注意;脱毒苗的意义：;一、植物病毒的分布及危害;（二）病毒对植物的危害 1.随着作物栽培时间的推移，发现的病毒种类会越来越多，许多作物被多种病毒侵染。 2. 病毒危害极大，又不能通过化学杀菌剂和抗菌素进行防治和消除;二、植物脱毒方法;（一）热处理脱毒法;（二）茎尖培养脱毒法; 2. 茎尖培养脱毒的基本操作步骤 ;3. 影响茎尖培养脱毒效果的因素 （1）培养基（无机离子、生长调剂物质、状态） （2）外植体大小（小到足以能根除病毒，大到足以能发育成一个完整的植株） （3）光照（光培养的效果通常都比暗培养好） （4）外植体生理状态 ;（三）茎尖培养与热处理相结合脱毒法;（四）微体嫁接法;（五）愈伤组织脱毒法;（六）花药组织脱毒法;（七）化学方法;（八）低温结合茎尖培养法;三、脱毒植株检测方法;（一）直接检测法;（二）指示植物检测法;2. 指示植物分类： （1）接种后产生系统性症状，其出现的病毒扩展到植物非接种部位，通常没有局部病斑明显 （2）接种后只产生局部病斑，常有坏死、退绿或坏斑构成。 3. 常用指示植物： 千日红、野生马铃薯、光曼陀罗、辣椒、酸浆、心叶烟、黄花烟草、豇豆、莨菪、昆诺阿藜、苋色藜等，病毒寄生范围不同，同一病毒可用一种或几种指示植物进行鉴定。;4. 指示植物检测法分类 （1）汁液感染法 指示植物检测法对依靠汁液传播的病毒，可采用摩擦损伤汁液传播鉴定法 （2）嫁接检测法 对不能依靠汁液传播的病毒，则采用指示植物嫁接法 ;（三）抗血清检测法; 优点：简便、准确、速度快，一般几分钟至几个小时即可完成，所以抗血清检测已经成为植物病毒鉴定最有效的方法之一 酶联免疫吸附法（ ELISA）是把抗原抗体免疫反应与酶的催化反应相互结合而发展起来的一种综合性技术 ELISA检测技术有自动化及试剂盒的发展趋势，因而是目前病毒检测方法中发展最快，应用最广的一种方法;（四）分子生物学检测法