植物组织培养技术.ppt

********************************************************************************************************************************************************************************************************************7、分装

溶化的培养基应该趁热分装。注意不要让培养基沾到瓶口和瓶壁上。锥形瓶中培养基的量约为锥形瓶容量的1/5～1/4。每1L培养基，可分装20～30瓶。

8、包扎

用封口膜封口，外边可加一层牛皮纸，扎好绳子，用铅笔或碳素墨水笔在牛皮纸上写上培养基的代号。

9、培养基的灭菌

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?培养中温度、光照、湿度等各种环境条件，培养基组成、pH值、渗透压等各种化学环境条件都会影响组织§4培养条件的选择第95页，共105页，星期日，2025年，2月5日一.光照的影响培养中光照也是重要的条件之一，主要表现在光强、光质、以及光周期等方面：光周期：黑暗与光照交替的时间光量：光照强度光质：光的波长第96页，共105页，星期日，2025年，2月5日

例1：黑暗中培养的烟草花药，其胚状体的分化与幼植物的

生长，同经光照培养一样的多

例2：短日照敏感的葡萄品种，它的茎切段，仅在短日照条

件下才能分化成根

例3：对日照不敏感的葡萄品种，可在任何光周期下分化成

根

结论：光周期的需要与否，应根据植物种类、培养的目的来决定

1、光周期对植物细胞脱分化和再分化的效应第97页，共105页，星期日，2025年，2月5日?最常用的周期是16h的光照，8h的黑暗。

愈伤组织诱导阶段，一般采用三种做法：全暗、周期性光照、散射性光照。依据植物种类不同做法不同，多数植物适合全暗或周期性光照，

器官发生阶段：一般给予周期性光照比较好。

离体培养中光周期的调节第98页，共105页，星期日，2025年，2月5日光照强度对培养细胞的增殖和器官的分化有重要影响，从目前的研究情况看，光照强度对外植物体、细胞的最初分裂有明显的影响。

一般来说，光照强度较强，幼苗生长的粗壮，而光照强度较弱幼苗容易徒长。

离体培养条件下常用的光量，一般为1000-4000lx（勒克斯）。离体培养中通常难以达到4000lx，一般光量在2000-3000lx。光照强度的高低直接影响器官分化的频率高光量可以降低植物体内生长素水平，低光量使植物体内生长素素水平较高，容易生根

2、光量的影响第99页，共105页，星期日，2025年，2月5日

光质对愈伤组织诱导，培养组织的增殖以及器官的分化都有明显的影响。如百合珠芽在红光下培养，2周后，分化出愈伤组织。但在蓝光下培养，几周后才出现愈伤组织，而唐菖蒲子球块接种15天后，在蓝光下培养首先出现芽，形成的幼苗生长旺盛，而白光下幼苗纤细。

离体培养条件下，一般用日光灯进行光照，光谱成分主要是蓝紫光，波长为419-467nm。

对芽分化有效光谱成分为蓝紫光，根分化则受600-680nm所刺激。

3、光质的影响第100页，共105页，星期日，2025年，2月5日二.温度的影响培养都是在23～27℃之间进行，一般采用25±2℃。喜温性植物：茄科、禾本科、兰科等。培养温度一般控制在26-28℃冷凉性植物：百合科、十字花科、菊科等。通常培养温度控制在18-22℃或25℃第101页，共105页，星期日，2025年，2月5日三.湿度的影响组织培养中湿度的影响有两个方面：一是培养容器内的湿度条件，容器内主要受培养基水分含量和封口材料的影响。一是环境的湿度条件。环境的相对湿度一般要求70～80%。常用加湿器或经常洒水的方法来调节湿度。第102页，共105页，星期日，2025年，2月5日四.pH值?不