细胞因子及抗体检测技术.pdf
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细胞因子及抗体检测技术.ppt
（七）结果判定操作方法：拭干板底附着的液体，然后将板正确放入酶标比色仪中。以蒸馏水校零点，测读底物孔（未经任何反应仅加底物液的孔）和空白孔（以生理盐水或稀释液代替标本作全过程的孔），以记录本次试验的试剂状况。其后可用空白孔以蒸馏水校零点，以上各孔的吸光度需减去空白孔的吸光度，然后进行计算。结果判定：光密度（oplicaldensity，OD），现按规定用吸光度（absorbence，A），两者含义相同。通常的表示方法是将吸收波长写于A字母的右下角，如OPD的吸收波长为492nm，表示方法为A492nm或OD492nm。第31页,共44页，星期六，2024年，5月定性测定定性测定的结果判断作出“
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细胞因子及抗体检测技术.ppt
包被条件pH9.6碳酸盐缓冲液pH7.2磷酸盐缓冲液pH7-8Tris-HCl缓冲液。方法：加入包被液后，在4-8℃冰箱中放置过夜或37℃中保温2小时。浓度：随载体和包被物的性质可有很大的变化，每批材料需通过实验与酶结合物的浓度协调选定。一般蛋白质的包被浓度为10ng/ml-20ug/ml第23页，共44页，星期日，2025年，2月5日最适工作浓度的选择可用棋盘滴定法在夹心ELISA法中选择包被抗体和酶标抗体工作浓度，即利用棋盘滴定，将包被抗体和酶标抗体稀释成一系列浓度，反应后显色。阳性值在0.8左右，阴性值小于0.1为最适，可据此选择包被抗体和酶标抗体的工作浓度第24页，共44页，星期日，2
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细胞因子的检测.ppt
**********************第三节常用细胞因子的检测方法一、IL-2的检测二、IFN-γ的检测三、TNF的检测第32页,共38页，2024年2月25日，星期天待检样品（细胞上清）指示细胞（CTLL-2）按不同稀释度加入37oC，16-20小时加入3HTdR（1-5?Ci）37oC，4-6小时收集细胞测定白细胞介素-2的测定示意图第33页,共38页，2024年2月25日，星期天待检样品（细胞上清）指示细胞（L929）按不同稀释度加入37oC，4小时37oC，24-48小时弃取上清，加入VSV观察细胞病变（镜检或比色）干扰素的测定示意图第34页,共38页，2024年2月25日，星期
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细胞因子检测.ppt
*关于细胞因子检测第1页，共27页，星期日，2025年，2月5日细胞因子一类由细胞分泌，具有多种功能的高活性小分子蛋白，参与免疫调节和多种生理病理过程等。白细胞介素(interleukin,IL)干扰素(interferon,IFN)肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor,TNF)集落刺激因子(colonystimulatingfactor,CSF)生长因子(growthfactor,GF)趋化因子(chemokine)第2页，共27页，星期日，2025年，2月5日优点：敏感、可靠；缺点：需长期饲养细胞、检测耗时长、步骤繁杂。1不同的CK具有不同的生物学活性，选择CK独特的生物学
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细胞因子检测.ppt
* * * * * * 细胞因子的检测方法 左大明 zdaming@ 细胞因子 一类由细胞分泌，具有多种功能的高活性小分子蛋白，参与免疫调节和多种生理病理过程等。 白细胞介素(interleukin, IL) 干扰素(interferon, IFN) 肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF) 集落刺激因子(colony stimulating factor, CSF) 生长因子(growth factor, GF) 趋化因子(chemokine) 优点：敏感、可靠； 缺点：需长期饲养细胞、检测耗时长、步骤繁杂。 1 不同的CK具有不同的生物学活性，选择CK独
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细胞因子检测技术-深度研究.pptx
细胞因子检测技术
细胞因子检测技术概述
检测方法分类及原理
免疫学检测技术
分子生物学检测技术
检测技术的应用领域
检测技术的优势与局限性
检测技术发展前景
检测技术标准化与质量控制ContentsPage目录页
细胞因子检测技术概述细胞因子检测技术
细胞因子检测技术概述1.早期技术以酶联免疫吸附试验（ELISA）为主，操作复杂，灵敏度有限。2.随着生物技术的发展，流式细胞术、蛋白质芯片等新技术逐渐应用于细胞因子检测，提高了检测的灵敏度和准确性。3.近年来，基于纳米技术和分子印迹技术的细胞因子检测方法不断涌现，为细胞因子研究提供了新的工具。细胞因子检测技术的分类与原理1.按照检测原理分类，主要
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细胞因子检测方法.ppt
ELISPOT发展历史1963年：Jerne等人创立的溶血空斑技术(hemo-lyticplaqueformingcellassay,HPF),这项技术可用于检测并计数单个抗体形成细胞。1983年：Czerkinsky等成功地检测出因受刺激而分泌抗体的B细胞频率接近体内实验的环境，藉由检测T细胞分泌的各类细胞因子，来定量机体内免疫反应启始者PrecursorT亚群的大小，预测体内免疫系统即将进行的下游免疫反应。1996：俄亥俄卅CaseWesternReserve大学PaulLehmann团队引进PVDF薄膜的应用（Forsthuberetal.,Science,1996），解决了低敏感度的问
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细胞因子的检测和应用.ppt
细胞因子受体检测技术受体cDNA分析酶免疫技术检测法某些细胞因子受体除存在于细胞膜外，尚可分泌进入体液，称为可溶性细胞因子受体（solublecytokinereceptor）,如sIL-2R、sIL-4R和sIFN-γR。这类受体多采用ELISA法检测。重组细胞因子与受体的交联分析利用化学交联剂将标记的重组细胞因子与膜受体交联，细胞裂解物经PAGE电泳后作放射自显影分析，通过带型分析可确定受体的分子量及亚单位。第31页,共46页，2024年2月25日，星期天三种细胞因子测定方法的比较生物学检测法：比较敏感，直接测定生物学功能，可靠，但需培养依赖性细胞株、耗时长、步骤繁，影响因素多，不易掌握。
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细胞因子检测资料.docx
检查
细胞因子检测
细胞因子是由免疫细胞和某些非免疫细胞经刺激而合成、分泌的一类生物活性物质分泌的蛋白质,在体内广泛参与免疫调节及炎症反应、组织修复、刺激造血系统、刺激细胞的增殖与凋亡等重要生理活动,在抵抗外来病原及维持机体内环境平衡中均起重要作用。某些刺激因子也可导致一些细胞因子超量表达,或表达减少,从而参与疾病的发病及病理过程。
免疫学检测法 其基本原理是将细胞因子作为抗原进行定量检测。如免疫斑点法、ELISA法、RIA法和免疫印迹法等均已用于细胞因子的检测。
2.、生物学测定法 其原理是根据细胞因子对特定的依赖性细胞株(即靶细胞)的促增殖作用,以增殖细胞中的DNA的合成或酶活性为
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《细胞因子检测概述》.pptx
《细胞因子检测概述》;目录;01;细胞因子的定义;细胞因子的分类;细胞因子的生物学功能;02;酶联免疫吸附测定（ELISA）;化学发光免疫测定（CLIA）;流式细胞术;03;疾病诊断;疾病治疗监测;药物研发;04;检测标准;质量控制措施;检测结果的解读;05;检测方法的局限性;生物样本的局限性;临床应用的局限性;06;新型检测技术的应用;多参数检测技术;个体化检测;07;案例一：某疾病患者细胞因子检测分析;案例二：某药物疗效监测中的细胞因子检测;案例三：细胞因子检测在药物研发中的应用;THANKS
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细胞因子的检测和应用.pptx
细胞因子的检测及应用 ;发展历史和命名 ;概述 ;共同特点
1) 正常休止状态的细胞必须经刺激和活化后才能合成和分泌CKs, 细胞内无细胞因子前体储存,接受刺激后从激活基因开始至合成,分泌,刺激结束后细胞因子的产生随即停止.。
2）绝大多数CKs均为低分子量（4～80kD）的糖蛋白。
3） 分泌特性：大多数的CKs是通过旁分泌（paracrine） ，或自分泌（autocrine），少部分通过内分泌的形式作用于远处靶细胞或靶器官；
4）多样性：一种细胞可产生多种细胞因子，不同类型细胞也可产生一种或几种相同的细胞因子。
5）网络性：协同效应
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第16章-细胞因子与粘附因子检测.ppt
基因水平：PCR技术。 检测水平 生物活性测定 蛋白水平 免疫学测定 第二节 临床常用的测定方法 掌握 齐齐哈尔医学院免疫 生物活性测定：测活性。灵敏 性高,特异性低 蛋白水平 ELISA 免疫学测定 化学发光酶免疫试验 （ 含量） 流式细胞术 酶联免疫斑点试验
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细胞因子临床意义及检测技术.pptx
;目录;目录;细胞因子;细胞因子分类;细胞因子生物学功能;细胞因子作用特点;目录;IL-1β，感染和损伤的初步防御;IL-2和IL-2R，影响机体免疫平衡;IL-4、IL-5，与过敏密切相关的抗炎因子;IL-6，核心促炎因子;IL-8，披着炎症因子外衣的趋化因子;IL-10，强大的炎症抑制因子;由树突状细胞(DC)、巨噬细胞、B淋巴细胞以及其他抗原递呈细胞(APC)产生。
IL-12p70是真正具有生物活性的IL-12，以两亚基(P40和P35)结合形式存在，具有抗肿瘤活性，诱导早期辅助性T细胞分化为Th1细胞，并促进Th1细胞的发育和增殖，在抗肿瘤和免疫激活中发挥作用。
IL-12P70能促
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细胞因子与黏附分子检测.pptx
临床免疫学检验技术
第十六章
细胞因子与黏附分子检测郑晓群
目录01第一节概述第二节临床常用的测定方法第三节细胞因子与黏附分子测定的临床应用02
第一节概述
01细胞因子与黏附分子概念03细胞因子的生物学功能02细胞因子的作用特点04黏附分子的生物学功能重点提示
概念细胞因子（cytokine）是由免疫细胞及组织细胞表达并分泌的，在细胞间发挥相互调控作用的一类小分子蛋白质或多肽，通过与细胞表面相应受体的结合发挥生物学效应。
黏附分子（adhesionmolecules，AM）0102是由细胞产生、介导细胞间或细胞与细胞外基质间相互结合的分子，以受体-配体结合的形式发挥作用。概念
趋化因子（ch
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细胞因子释放检测
目录细胞因子概述细胞因子释放的生物学意义细胞因子释放检测的重要性细胞因子释放检测方法概述体外细胞因子释放检测方法ELISA技术详解流式细胞术详解ELISPOT技术详解实时定量PCR检测细胞因子多重细胞因子检测技术细胞因子释放检测的应用案例细胞因子释放检测的挑战与展望细胞因子释放检测实验设计
1.细胞因子概述细胞因子是一类由免疫细胞和非免疫细胞产生的，具有广泛生物学活性的多肽或蛋白质。它们在细胞间通讯、免疫应答调节、炎症反应以及细胞生长和分化中发挥着关键作用。细胞因子的种类繁多，功能复杂，是免疫系统的重要组成部分。深入了解细胞因子的特性和作用机制，有助于我们更好地理解免疫系统的