GB 5413.19-2010食品安全国家标准　婴幼儿食品和乳品中游离生物素的测定.pdf

中华人民共和国国家标准 GB 5413.19—2010 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中游离生物素的测定 National food safety standard Determination of free biotin in foods for infants and young children, milk and milk products 2010-03-26 发布 2010-06-01 实施 中华人民共和国卫生部 发布 GB 5413.19—2010 前 言 本标准代替GB/T 5413.19-1997 《婴幼儿配方食品和乳粉游离生物素的测定》。 本标准附录A为规范性附录。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： ——GB 5413-1985 、GB/T 5413.19-1997 。 I GB 5413.19—2010 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中游离生物素的测定 1 范围 本标准规定了婴幼儿食品和乳品中游离生物素的测定方法。 本标准适用于婴幼儿食品和乳品中游离生物素的测定。 2 规范性引用文件 本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本 适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。 3 原理 利用植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum ）对游离生物素的特异性和灵敏性，定量测定出试样中待 测物质的含量。在含有除待测物质以外所有营养成分的培养基中，微生物的生长与待测物质含量呈线性 关系，根据透光率与标准工作曲线进行比较，即可计算出试样中待测物质的含量。 4 试剂和材料 除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，水为 GB/T 6682 规定的二级水。 4.1 菌株：植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum ），ATCC 8014 。 4.2 生物素（d-Biotin 或 Vitamin H ）标准品（C H N O S）：纯度≥99 % 。 10 16 2 3 4.3 培养基 4.3.1 乳酸杆菌琼脂培养基：见附录 A 。 4.3.2 乳酸杆菌肉汤培养基：见附录 A 。 4.3.3 生物素测定用培养基：见附录 A 。 注：一些商品化合成培养基效果良好，商品化合成培养基按标签说明进行配制。 4.4 乙醇溶液（50 % ）。 4.5 硫酸溶液（3 % ）：量取3mL 硫酸加入到水中，定容至 100 mL。 4.6 氢氧化钠溶液（0.5 mol/L ）：称取20 g 氢氧化钠溶于 1000 mL 水中。 4.7 氯化钠溶液（9 g/L ）：称取9.0 g 氯化钠溶解于 1000 mL 水中，分装试管，每管 10 mL。121℃灭 菌 15 min。 4.8 标准溶液的制备 4.8.1 生物素标准贮备液（100 μg/mL ）：称取生物素标准品（4.2 ）用乙醇溶液（4.4 ）定容至生物素 浓度为 100 μg/mL，贮于冰箱中。 4.8.2 生物素标准中间液（1