模块二中药中化学成分的常规分离技术.ppt

这是纯化固体成分最后阶段的重要方法。1.原理利用混合物中各成分在冷热结晶溶剂中溶解度的不同进行分离的。非晶形物质经结晶操作形成有晶形的过程称为结晶。不纯的结晶再次结纯化的过程称为重结晶。（五）结晶法第37页,共59页，星期六，2024年，5月结晶的关键：合适的溶剂理想溶剂具备的条件：（1）与被结晶成分不发生化学反应。（2）要对被结晶成分热时溶解度大、冷时溶解度小。（3）对杂质或冷热时都溶解，或冷热时都不溶解。（4）沸点不宜太低或太高。二、结晶溶剂的选择第38页,共59页，星期六，2024年，5月常用溶剂：水、冰乙酸、甲醇、丙酮、氯仿、乙醇、乙酸乙酯等。混合溶剂：不能一种选择合适溶剂时，通常选用两种或两种以上溶剂组成混合溶剂。如：乙醇－水、丙酮－水、吡啶－水等重结晶选用的溶剂相应有所不同第39页,共59页，星期六，2024年，5月（五）结晶法溶解度结晶溶剂冷时热时有效成分杂质小大小小大大第40页,共59页，星期六，2024年，5月不溶物（杂质）样品样品溶液滤液滤（母）液（杂质＋少量有效成分）结晶（有效成分）【注】①所得结晶若不纯，可重结晶进一步精制。②适当浓缩母液，放冷析晶，所得结晶确证后决定是否合并。放冷析晶，过滤加适量结晶溶剂加热溶解【回流】趁热过滤【抽滤】2.操作过程第41页,共59页，星期六，2024年，5月3.操作注意1）.选择合适溶剂（溶解度、沸点）2）.结晶条件：溶液浓度、粘度、温度、时间浓度过大，杂质浓度和溶液粘度也相应增大，会阻碍结晶的析出。降温的速度要慢，使结晶慢慢形成，速度过快，形成的结晶颗粒小或成无定形粉末。第42页,共59页，星期六，2024年，5月4.促进结晶的方法：1.可用玻棒磨擦器壁，或加入晶种，挥去部分溶剂的方法促进析晶。2.采用混合溶剂的方法结晶。3.制备结晶衍生物。如生物碱制成盐，羰基化合物制成乙酰化合物，内酯开环成盐等。第43页,共59页，星期六，2024年，5月4.结晶纯度的判断结晶外观的色泽是否均匀、晶形一致程度是否具有一定的熔点和较小的熔距薄层色谱或纸色谱技术，经数种不同的展开系统展开是否均能得到单一近圆形的斑点来判断结晶的纯度。必要时，可制备衍生物，采用高效薄层色谱、气相色谱、高效液相色谱来进一步确定结晶的纯度。第44页,共59页，星期六，2024年，5月第45页,共59页，星期六，2024年，5月盐析法透析法分馏法（六）其他分离方法第46页,共59页，星期六，2024年，5月1.盐析法原理盐析法是指天然产物的水提液中，加入大量无机盐，使其达到一定浓度或饱和，促使其有效成分在水中溶解度降低而沉淀析出，与其他水溶性较大的杂质分离。常用作盐析的无机盐类包括氯化钠、硫酸钠、硫酸镁、硫酸铵等。其中硫酸铵具有盐析能力强、饱和溶液浓度大、溶解度受温度影响小、不引起蛋白变性等优点，而多用于蛋白质等高分子物质的盐析分离。第47页,共59页，星期六，2024年，5月盐析法应用从中药中分离有效成分。分离蛋白质等高分子物质（通过调节硫酸铵的浓度）。盐析后，滤液和沉淀物均混入无机离子，可用透析法或离子交换树脂法进行脱盐处理。第48页,共59页，星期六，2024年，5月2、透析法原理：是利用提取液中小分子物质或能在水、乙醇提取液中解离成离子的物质可通过透析膜，而大分子物质不能通过透析膜（如多糖、蛋白质、鞣质、树脂等不能通过透过透析膜）性质，借以达到分离的目的。第49页,共59页，星期六，2024年，5月第50页,共59页，星期六，2024年，5月应用：此法常用于分离纯化皂苷、蛋白质、多肽、多糖等大分子成分，以除去无机盐、单糖、双糖等小分子杂质。常用的透析膜（需根据分离成分的分子量大小来选择）（1）动物膀胱膜（2）火棉胶膜（3）羊皮纸膜（4）再生纤维素膜（5）玻璃纸膜（6）蛋白胶膜第51页,共59页，星期六，2024年，5月操作步骤：(1)将浓缩的中药水提液或乙醇提取液缓缓加入透析膜袋内，防止膜破裂，悬于盛有蒸馏水的容器中，水浴加温透析，并保持一定液面。透析过程中经常更换透析袋