大孔吸附树脂法去除车前草粗多糖中的蛋白质.pdf

大孔吸附树脂法去 除车前草粗 多糖 中的蛋 白质 廖春燕 ，杨远萍 (广西212学 院生物 与化 学工程系 ，广 西 柳 州 ，545006) 摘 要 研 究AB一8大孔树脂法去除车前草粗 多糖 中蛋 白质的适宜条件。采用动态 吸附和解析实验对树脂纯化 工艺进行优化。结果表 明适宜工艺条件为 ：上样液浓度 40mtg／mL，上样流速 0．5mL／min，上样液 pH值 7．0；以 蒸馏水为洗脱剂 ，洗脱速度 2mL／min，洗脱体积2．5BV(1BV=20mL)。纯化后 AB一8大孔 吸附树脂对车前草粗 多糖 中的蛋 白具有较高的去除效果 ，蛋 白去除率为 84．83％，多糖保 留率为88．32％。 关键词 车前草，多糖 ．大孔吸附树脂 ，除蛋 白 车前草为临床上 的常用中药 ，其性味甘寒 ，可人 离心机 。 肾经 、肝经和肺经 ，具有利水通淋 、止泻 、清肝明 目、清 1．2 实验方法 肺化痰等功效。车前草 中含大量黏液质车前子胶 ，属 1．2．1 车前草多糖提取液的制备 于多糖类成分 ，经初步研究表 明 ，其中含有 D一半乳糖 洗净后 的车前草放入 60℃的烘箱 内烘干至恒 (28％)，D-葡萄糖 (6％)，D-甘露糖 (2％)，L-鼠李糖 重 ，粉碎 ，过40筛 ，备用。用热水浸提法提取多糖 ，料 (4％)，D一葡萄糖酸 (31％)及少量 D一木糖和炭藻糖 ， 液比(g：mL)1：20，80℃水浴 ，浸提2h，得到的提取液 主要以B．1，4连接为主链 ，2和 3位含侧链 。车前 过滤 ，浓缩 ，定容 (浓度为 40mg／mL)。 草萃取物所含的多糖体可 以提升人体非特异性免疫 1．2．2 多糖含量 的测定 防御能力 ，还有抗抑郁 、清除氧 自由基作用 。 多糖保留率／％=差霎 ×0。 国内许多研究学者对多糖的活性功能做 了大量 采用硫酸一苯酚法 测定车前草多糖含量 ，以葡 的研究 ，车前草多糖具有抗氧化 等功效也有 许多报 萄糖为对照品。 道 ，但对车前草多糖脱蛋 白的方法缺乏相应 的研 1．2．3 蛋 白质含量 的测定 究 。本文通过大孔吸 附树脂脱蛋 白方法与传统脱蛋 采用考马斯亮 蓝染色法 测定蛋 白质含量 ，以 白方法 比较 ，改进车前草多糖的脱蛋 白工艺。 牛血清蛋 白为标准品。 1 材料和方法 蛋 白去 除率／％ = 处理前 的蛋 白质含 量 一处理后 的蛋 白质含量 ×100 1．1 材料和仪器 处理前 的蛋 白质含量 车前草 ，购 于柳州 市 中药 材市场 ；AB一8大孔树 1．3 AB-8大孔树脂除蛋 白质工艺 脂 ，上海摩速科学器材有限公司；牛血清蛋 白、考马斯 1．3．1 AB-8大 孔 吸 附树 脂 的预 处 理 亮蓝 ，国药集 团化学试剂有