紫外可见分光光度法的基本原理紫外可见分光光度法课件.ppt
紫外-可见分光光度法的基本原理紫外-可见分光光度法紫外-可见分光光度法的基本原理1.透光率与吸收度I0=Ia+It+IrI0=Ia+It透射光强度It与入射光强度I0的比值称为透光率或透光度T。透光率的负对数为吸光度A。紫外-可见分光光度法的基本原理概念:以波长λ为横坐标、吸光度A为纵坐标所描绘的曲线称为吸收光谱曲线,简称吸收光谱。特点:在相同条件下,同一物质的不同浓度的溶液,其吸收光谱曲线相似,且λmax相同。这是定性分析的基础。?A480520560nm?max=5152.吸收光谱曲线紫外-可见分光光度法的基本原理3.光的吸收定律当一束平行的单色光通过均匀、无散射的含有吸光性物质的溶液时,在入射光的波长、强度及溶液的温度等条件不变的情况下,该溶液的吸光度A与溶液的浓度c及液层厚度L的乘积成正比,即A=K·L·c,称为光的吸收定律(朗伯-比尔定律)。光的吸收定律是定量分析的理论依据。紫外-可见分光光度法的基本原理朗伯-比尔定律不仅适用于可见光,而且也适用于紫外光和红外光;不仅适用于均匀、无散射的溶液,而且也适用于均匀、无散射的固体和气体。实验证明,溶液对光的吸光度具有加和性。如果溶液中同时存在两种或两种以上的吸光性物质,则测得的该溶液的吸光度等于溶液中各吸光性物质吸光度的总和,即: A(a+b+c)=Aa+Ab+Ac3.光的吸收定律紫外-可见分光光度法的基本原理4.吸光系数(1)摩尔吸光系数:在入射光波长一定时,溶液浓度为1mol/L,液层厚度为1cm时所测得的吸光度称为摩尔吸光系数,常用ε表示,其量纲为L/(mol·cm)。(2)比吸光系数:在入射光波长一定时,溶液浓度为1g/L,液层厚度为1cm时的吸光度称为吸收系数,常用α表示,其量纲为L/(g·cm)。(3)百分吸光系数:在入射光波长一定时,溶液浓度为1%(g/100ml)、液层厚度为1cm时所测得的吸光度称为百分吸光系数,常用表示,其量纲为100ml/(g·cm)根据上述定义,摩尔吸光系数和吸收系数、百分吸光系数之间的换算关系是:紫外-可见分光光度法的基本原理例用氯霉素(相对分子质量为323.15)纯品配制100ml含2.00mg的溶液,以1.00cm厚的吸收池在278cm波长处测得其透光率为24.3%,试计算氯霉素在278cm波长处的摩尔吸光系数和百分吸光系数。解:已知M=323.15g/mol,ρ=2.00×10-3%,T=24.3%。求氯霉素在278cm波长处的摩尔吸光系数ε和比吸光系数。∵∴[100ml/(g·cm)]L/(mol·cm)4.吸光系数