GB/T 23881-2009饲用纤维素酶活性的测定　滤纸法.pdf

ICS 65. 120 B 46 中华人民共和国国家标准 GB/T 23881—2009 饲用纤维素酶活性的测定 滤纸法 Determination of feed cellulase activity — Filter paper assay method 2009-05-26 发布 2009-10-01 实施 发布 GB/T 23881—2009 —1— 刖 百 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出并归口。 本标准起草单位 ：国家饲料质量监督检验中心 （武汉）。 本标准主要起草人:何凤琴、杨林、钱昉、刘小敏、屈利文、黄婷、颜克亮。 I GB/T 23881—2009 饲用纤维素酶活性的测定 滤纸法 1范围 本标准规定了以滤纸为底物，用还原糖比色法测定饲用纤维素酶活性的方法。 本标准适用于饲用纤维素酶活性的测定,定量检测限为0.02 U/mLo 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 。凡是注日期的引用文件 ，其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版 。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 6682分析实验用水规格和试验方法 GB/T 14699. 1 饲料采样 GB/T 20195动物饲料试样的制备 3术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3. 1 滤纸纤维素酶活性单位 filter paper cellulase activity unit 在37 °C,pH5.5,反应60 min的条件下，每分钟降解滤纸释放1 Mmo 葡萄糖所需的酶量，定义为 一个滤纸纤维素酶活性单位，以U表示。 4原理 纤维素酶水解滤纸产生的纤维二糖、葡萄糖等还原糖能将碱性条件下的3,5-二硝基水杨酸还原， 生成棕红色的氨基化合物，在540 nm波长处有最大吸收，在一定范围内酶解产生的还原糖的量与反应 液的吸光值成正比。 5试剂和材料 本标准使用的试剂均为分析纯，水均为符合GB/T 6682中规定的二级水。 5. 1 酒石酸钾钠(C4H4KNa()h - 4H2O)o 5.2苯酚。 5.3亚硫酸钠。 5.4氢氧化钠溶液(200 g/L)：称取氢氧化钠20.0 g,加100 mL水溶解。 5.5柠檬酸溶液(0.1 mol/L) :称取柠檬酸(C6HaO7 - H2())2. 10 g,加水溶解定容至100 mLo 5.6 柠檬酸钠溶液 (0. 1 mol/L)：称取柠檬酸钠 (NaGHQ? • 2H2())2. 94 g,加水溶解定容至 100 mLo 5. 7柠檬酸盐缓冲液(0. 05 mol/L,pH5. 5)：称取柠檬酸(C(jHsO7 • H2())10. 5 g,加入氢氧化钠5. 0 g, 再加800 mL水溶解 ，用柠檬酸溶液 (5. 5)或柠檬酸钠溶液 (5. 6)调节pH至5. 5,再用水定容至 1 000 mLo