刺参肠道蛋白酶淀粉酶脂肪酶与纤维素酶活性的测定方法.pdf

鍪羹l溲薹型 《鱼墼工些》：至Q!至垂笪墅笪笪至Q塑 刺参肠道蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶与纤维素酶活性的测定方法 白燕王维新 (辽宁医学院畜牧辫医学院，辽宁锦州121001) 摘要：为探求更有效、更便捷地测定刺参肠道蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶与纤维素酶的活性方法．以 刺参肠道组织lo倍重量的磷酸缓冲液通过匀浆获得粗酶液。采用福林一酚法测定刺参肠道内蛋白酶活 4+15．028 力，使用3ml粗酶液，酪氨酸的回归方程为y=0．000 9x，决定系数R20．9955；采用淀粉一碘法测 定淀粉酶活力，使用粗酶液0．3ml；采用聚乙烯醇橄榄油乳化液水解法测定刺参脂肪酶活性，使用粗酶 液5ml；采用3，5一二硝基水杨酸法测定刺参纤维素酶活力，葡萄糖标准曲线方程为y=0．0058+0．059x， 决定系数R2=O．9980，使用粗酶液2 ml。由于刺参所摄食的饲料组成不同，其饲料中的组成成分对这4 种消化酶活性的影响程度就有很大差异。 关键词：刺参；淀粉酶；蛋白酶；脂肪酶；纤维素酶 中图分类号：Q55 文献标识码：A 刺参肠道消化酶主要有淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶 3．561 7．164 g(或Na：HPO。·12H：0g或无水Na2HPO。 和纤维素酶，饲料营养成分组成不同、水环境的变化 2．839 L蒸馏水中。 g)，溶解于1 0．02 以及刺参生理状态的波动都会对刺参消化酶活性造 M磷酸二氢钠溶液的配制：取NaH：PO。·H：O 3．121 L蒸馏水中。 成一定的影响。消化酶的测定是考察各种影响刺参生 2．76巅或NaH2P04·2H20g)，溶解于l 0．02 长生活因素的一个重要评判指标。有关水产动物肠道 将0．02M磷酸氢二钠溶液84m1。j M磷酸 M 消化酶活性的测定报道较多，刺参肠道消化酶活性的 二氢钠溶液16ml混合，即为o．02pH值7．5磷酸 测定也少有报道，但都不够详实。尤其是刺参肠道消 缓冲液。 化酶活性的测定力‘法并不具较强的指导意义和便利 1．1．2 0．5％酪素 MNaOH1 的操作性。本文是在测定刺参肠道4种消化酶的基础 称取酪蛋门0．5g，以0．5 ml润湿，加入 上，将刺参消化酶活性的测定方法包括试剂来源及配 60ml0．02MpH值7．5的磷酸缓冲液稀释润湿后的 制、测定步骤以及相关的标准曲线等都加以系统的总 酪蛋广1，在热水浴中不停搅拌，直至完全溶解，冷却后， M 结和详细的阐述，以供同行参考。 完伞转入100ml容量瓶中，用0．02 pH值7．5的磷 l 刺参肠道蛋白酶活力的测定 酸缓冲液定容至刻度，此溶液在冰箱中可保存一周。