微生物的分离与培养技术原理及其应用课件.ppt
讲完第1点后讲课本P22中间楷体字内容引出2、3、4、内容精品*2016届高三生物二轮复习精品*一、培养基的营养构成与类型划分营养构成划分依据培养基种类制备方法用途物理性质加凝固剂如:半固体培养基观察微生物运动液体培养基不加凝固剂工业生产化学成分天然培养基成分不明确的天然物质工业生产成分明确已知分离、纯化、鉴定、计数用途功能加入某种化学物质加入某种指示试剂水、无机盐、碳源和氮源还要满足特殊营养物质(生长因子)、氧气以及温度、PH要求。固体培养基琼脂分离、纯化、鉴定、计数合成培养基选择培养基鉴别培养基分离筛选特定微生物鉴别不同微生物精品*需分离微生物选择培养基鉴别培养基鉴定原理尿素分解菌纤维素分解菌大肠杆菌一般培养基伊红美蓝培养基大肠杆菌菌落呈现黑色,,带有金属光泽尿素作为唯一氮源酚红指示剂细菌合成的脲酶将尿素分解生成氨。使培养基的碱性增强,pH升高,指示剂变红纤维素作为唯一碳源刚果红染色法刚果红与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后,刚果红—纤维素复合物不能形成(或红色消失),培养基中出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。精品*四种纤维素分解菌在刚果红培养基上形成的透明圈大肠杆菌在伊红美蓝琼脂培养基上的黑色带金属光泽的菌落精品*二、操作技术——微生物分离培养成功关键(消毒与灭菌)1、实验操作者双手:2、接种环、接种针或试管口、瓶口:3、锥形瓶、培养皿:4.培养基:(不能采用干热灭菌)无菌70%酒精消毒灼烧灭菌干热灭菌和高压蒸汽灭菌(湿热灭菌)高压蒸汽灭菌精品*【例题1】为了获得β-胡萝卜素产品,某小组开展了产β-胡萝卜素酵母的筛选与色素提取实验。请回答下列问题:(1)实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是;为了防止冷凝水渗入及减少灭菌后器皿或培养基被污染,灭菌前应该。(2)为了筛选出酵母菌,培养基中添加了青霉素,其目的是。干热灭菌和高压蒸汽灭菌(湿热灭菌)牛皮纸或几层报纸包扎紧抑制细菌生长精品*高压蒸汽灭菌锅压力表安全阀放气阀灭菌桶排气软管精品*【例题1】为了获得β-胡萝卜素产品,某小组开展了产β-胡萝卜素酵母的筛选与色素提取实验。请回答下列问题:(3)右图是灭菌锅及其局部剖面示意图,图中甲、乙、丙依次是。(填序号)①安全阀、放气阀、压力表②放气阀、安全阀、压力表③安全阀、放气阀、温度表④放气阀、安全阀、温度①精品*【例题1】为了获得β-胡萝卜素产品,某小组开展了产β-胡萝卜素酵母的筛选与色素提取实验。请回答下列问题:(4)为了将分离到菌株纯化,挑取菌落在3块相同平板上划线,结果其中一块平板各划线区均未见菌生长,最可能原因是。(5)为增加β-胡萝卜素提取量,在研磨酵母细胞时,添加石英砂的目的是;研磨时(填“需要”或“不需要”)添加CaCO3,理由是。接种环温度过高,菌被杀死研磨充分不需要β-胡萝卜素较耐酸(较稳定)精品*计算大肠杆菌的分离纯化培养(一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基?称量?溶化(调节PH)?灭菌?倒平板(50℃)精品*倒平板(50℃)精品*防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染;使培养基表面的水分更好地挥发平板倒置平板冷凝打开一条缝隙倒平板(50℃)精品*大肠杆菌的分离纯化培养(二)分离纯化大肠杆菌方法一、平板划线法精品*方法一、平板划线法精品*单菌落丙甲乙精品*(一)系