食品添加剂 丙酸钙检验方法.pdf

GB 25548－×××× 附 录 A 检验方法 A.1 警示 试验方法规定的一些试验过程可能导致危险情况。操作者应采取适当的安全和防护措施。 A.2 一般规定 除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB/T 6682 －2008 中规定的三级水。 试验方法中所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时， 均按GB/T 601、GB/T 602 和GB/T 603 之规定制备。 A.3 鉴别试验 A.3.1 试剂和材料 A.3.1.1 盐酸溶液：1+3。 A.3.1.2 硫酸溶液：1+9。 A.3.1.3 草酸铵溶液：40g/L。 A.3.1.4 乙酸溶液：1+20。 A.3.2 分析步骤 A.3.2.1 丙酸鉴别 称取 0.5 g 样品，精确至 0.01 g，置于装有 5 mL 水的 100 mL 烧杯中，搅拌溶解，加 5 mL 硫酸溶液，加热时，应有特殊臭味产生。 A.3.2.2 钙盐鉴别 称取 0.5 g 样品，精确至 0.01 g，置于装有 5mL 水的 100 mL 烧杯中，搅拌溶解，加草酸铵 溶液，即产生白色沉淀。分离沉淀，加乙酸溶液，沉淀不溶解；再加盐酸溶液，可完全溶解。用盐 酸湿润后的铂丝蘸取样品，在无色火焰中呈红色。 A.4 丙酸钙含量测定（高效液相色谱法） A.4.1 试剂与材料 A.4.1.1 磷酸。 A.4.1.2 磷酸氢二铵。 A.4.1.3 磷酸溶液：1 mol/L。在50 mL 水中加入53.5 mL 磷酸混匀后加水定容至1000 mL。 A.4.1.4 磷酸氢二铵溶液：1.5 g/L。称取磷酸氢二铵1.5 g,加水溶解定容至1000 mL。 A.4.1.5 丙酸标准品(CH O )：色谱纯，质量分数不小于99.5%。 3 6 2 A.4.1.6 丙酸标准贮备液：10 mg/mL。精确称取1000.0 mg 丙酸标准品于100 mL 容量瓶中，加水至 刻度，置于4 ℃冰箱中保存，有效期为6 个月。 A.4.2 仪器和设备 A.4.2.1 高效液相色谱仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器，整机灵敏度和稳定性符合GB/T 16631 中有关规定。 A.4.2.2 天平：感量0.0001g 和0.01g。 A.4.2.3 pH 计。 A.4.3 分析步骤 A.4.3.1 样品制备与处理 准确称取约0.2g （精确至0.0001 g）经过A.7 干燥减重后的样品放入500 mL 容量瓶，加入400 mL 的水，摇匀，用1 mol/L 磷酸溶液调pH 为3.0 左右，用水定容至刻度，配置成样品溶液。 A.4.3.2 色谱操作条件 A.4.3.2.1 色谱柱：C18 柱，4.6 mm×250 mm，5 μm 或等效色谱柱。 A.4.3.2.2 流动相：1.5 g/L 磷酸氢二铵溶液，用1 mol/L 磷酸溶液调pH 为2.7～3.5(使用时配制)， 经0.45 μm 微孔滤膜过滤。 3 GB 25548－×××× A.4.3.2.3 流速：1.0 mL/min。 A.4.3.2.4 柱温：25 ℃。 A.4.3.2.5 进样量：20 μL。 A.4.3.2.6 波长：214 nm。 A.4.3.2.7 色谱柱清洗参考条件：实验结束后，用10%甲醇清洗1h，再用100%甲醇清洗1h。 A.4.3.3 标准曲线绘制 分别准确吸取丙酸标准储备液1.0 mL、2.0 mL、3.0 m L、4.0 mL、5.0 mL 于100mL 容量瓶中， 用水定容至刻度，其浓度分别为100 μg/mL、200 μg/mL、300 μg/mL、400 μg/mL、500 μg/mL 。 经0.45 μm 微孔滤膜过滤,浓度由低到高进样，以浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。