食品添加剂 茶多酚棕榈酸酯检验方法.pdf

GB xxxx—xxxx 附录A 检验方法 A.1 安全提示 本标准试验方法中使用的部分试剂具有毒性或腐蚀性，按相关规定操作，使用时需小心谨慎。若溅到 皮肤上应立即用水冲洗，严重者应立即治疗。在使用挥发性酸时，要在通风厨中进行。 A.2 一般规定 本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T 6682-2008规定的三级水。试 验中所用标准溶液、杂质标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按GB/T 601、GB/T 602、GB/T 603的规定制备。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。 A.3 鉴别试验 A.3.1 试剂和材料 A.3.1.1 无水乙醇。 A.3.1.2 硫酸。 A.3.1.3 石油醚（沸点90 ℃~ 120 ℃）。 A.3.1.4 乙酸乙酯。 A.3.1.5 香草醛。 A.3.1.6 混合溶剂A ：将石油醚与乙酸乙酯按体积比 19:1 混合均匀。 A.3.1.7 香草醛显色液：准确称取1.0 g 的香草醛，溶解于100 mL 无水乙醇中，缓慢滴入20 g 硫酸，混匀 并冷却。 A.3.2 茶多酚鉴别试验 精确称取10.0 mg 茶多酚棕榈酸酯样品，置于10 mL 试管中。向试管加入4 mL 无水乙醇，震荡使其 溶解。再向试管中加入2 mL 香草醛显色液，震荡摇匀，静置5 min，显红色可以作为为茶多酚棕榈酸酯或 茶多酚的鉴别依据之一。 A.3.3 与水溶性茶多酚的鉴别试验 称取20mg~30 mg 茶多酚样品置于10 mL 离心试管1 中，再加入5 mL 混合溶剂A ，震荡溶解，在4000 rpm 下离心5 min 。将离心后的上清液转移到另一10 mL 离心试管2 中。再移取5 mL 混合溶剂A 加入到 离心试管1 中，在4000 rpm 离心5 min 。将离心后的上清液转移到离心试管2 ，合并上清液。将离心沉淀 溶于10 mL 无水乙醇，记为沉淀液。分别移取1 mL 上清液和1 mL 沉淀液到10 mL 试管中，各自加入4 mL 香草醛显色液，混合摇匀，等待5 min 显色。 观察显色结果，如果上清液呈红色，说明样品中含有茶多酚棕榈酸酯；如果沉淀液显红色，说明样品 中含有茶多酚；如果二者都显红色，说明样品是茶多酚棕榈酸酯和茶多酚的混合物。如果二者都不显色， 说明样品中既不含茶多酚，又不含茶多酚棕榈酸酯。 A.4 茶多酚棕榈酸酯含量的测定 A.4.1 试剂和材料 A.4.1.1 茶多酚棕榈酸酯：经45 ℃真空干燥至恒重后使用。 A.4.1.2 维生素C：经45 ℃真空干燥至恒重后使用。 A.4.1.3 没食子酸乙酯：样品经重结晶纯化，高效液相色谱检测纯度99.9%。经45 ℃真空干燥至恒重后使 用。或购置相当规格标准物质。 A.4.1.4 维生素C 溶液：0.075 mol/L，准确称取1.3222 g 维生素C，用水溶解后定容至100 mL。 A.4.1.5 三乙醇胺溶液：量取50.0mL 三乙醇胺，加入25mL 水稀释后转入100mL 容量瓶中，并用水稀释 至刻度。 2 GB xxxx—xxxx A.4.1.6 没食子酸乙酯标准储备溶液：准确称取0.1000 g 没食子酸乙酯，用水溶解后定容至100mL。 A.4.1.7 茶多酚棕榈酸酯乙醇溶液：准确称取约500 mg 茶多酚棕榈酸酯（精确至0. 1 mg ），记为茶多酚棕 榈酸酯干重m ，用无水乙醇溶解并定容至100mL。 A.4.1.8 酒石酸亚铁溶液：准确称取1.6050 g 硫酸亚铁（FeSO ·7H O ）和8.0440 g 酒石酸钾钠，分别用水 4 2 溶解后转入至1000 mL 容量瓶中，稀释至刻度。 A.4.2 分析步骤 A.4.2.1 于25 mL 容量瓶中依次移入5 mL 酒石酸亚铁溶液﹑1 mL 三乙醇胺溶液、2 mL 维生素C 溶液， 用水定容至刻度，充分摇匀