泡桐组培苗生产技术规程.docx

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泡桐组培苗生产技术规程

1范围

本文件规定了泡桐（Paulowniafortunei）组培苗生产技术的术语和定义、外植体采集和处理、诱导培养、增殖培养、生根培养、炼苗移栽、栽培管理等技术和要求。

本文件适用于泡桐组培苗的生产技术。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB6000主要造林树种苗木质量分级

GB/T15776造林技术规程

GB/T8321农药合理使用准则

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

GB/T20000.1界定的以及下列术语和定义适用于本文件。

3.1

外植体explants

植物组织培养过程中，从供体植物上取下来用于培养的细胞、组织或器官。

3.2

植物生长调节剂Plantgrowthregulator

具有调节植物生长发育作用的有机化合物。

3.3

芽诱导budsinduction

将培养材料放入诱导培养基中进行培养，分化出不定芽的过程。

4外植体采集和处理

4.1外植体采集

选择干形通直、生长茂盛、健康无病虫害的泡桐优良单株，选取生长旺盛当年生健壮的半木质化的茎段。

4.2外植体处理

4.2.1预处理

将采集的泡桐茎段剪去叶片，置于饱和洗衣粉或洗洁精溶液中浸泡10min～15min，并用自来水冲洗30min～60min，然后用0.1％多菌灵浸泡5min，再置于KQ-250B型超声波清洗器清洗30min。按木质化程度分别放入容器中，用纯净水冲洗3～4次，置于超净工作台上。

4.2.2消毒

在超净工作台上，用75％乙醇溶液浸泡外植体10s～30s，无菌水漂洗3次～4次，再用0.1％升汞或5％次氯酸钠溶液浸泡外植体，根据木质化程度浸泡8min～15min，无菌水漂洗5次～6次，再用无菌滤纸将枝条表面的水分吸干备用。将消毒后的泡桐枝条切口部分剪掉后，剪成带腋芽1～2个、长2.0cm~3.0cm的茎段，将茎段接种到初代诱导培养基中。

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5诱导培养

5.1诱导培养基

诱导培养基配方参见附录A.1。

5.2培养条件

培养温度为26℃±2℃。光照强度1500Lx～2000Lx，光照时间10h/d～13h/d。

5.3外植体接种

将外植体修剪为2cm的带芽茎段，茎段基部垂直接种到诱导培养基中，立稳。

6增殖培养

6.1增殖培养基

增殖培养基配方参见附录A.2。

6.2培养条件

同5.2。

6.3接种

待诱导培养的试管苗生长至≥4cm时，剪去上部叶片，剪取初始芽（高度保持在2cm～3cm），将其转入增殖培养基上培养。

6.4继代培养

增殖培养10d～20d后，将增殖芽分株为单芽或小丛，继续转入继代培养基。继代转接代数不宜超过30代。

7生根培养

7.1生根培养基

生根培养基配方参见附录A.3。

7.2培养条件

同5.2。

7.3生根转接

将生长健壮、长度≥3cm的继代增值芽丛分切为单芽茎段，剪去基部老叶、接种到生根培养基中，培养15d～20d。

8炼苗移栽

8.1炼苗

选取根数3条以上、根长达到1cm以上、生长健壮的组培生根苗，移到遮光度60％～70％，环境温度20℃~28℃的大棚内，进行炼苗3d～7d，移栽前2d～3d应松开培养瓶盖，以便逐渐适应外面的环境。

8.2基质

基质由黄心土∶椰糠∶河沙=1∶2∶2的体积配比混匀而成。在移栽前3d内用0.1％高锰酸钾（K2MnO4）溶液将基质淋透消毒，1d后再用清水淋洒洗去药液。

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8.3洗苗

选取苗高≥3cm，根系≥1cm，叶色浓绿、健壮的瓶苗，打开培养瓶盖，轻轻将培养基及幼苗倒出，用清水洗净幼苗根部的培养基，严禁撕掉根系。

8.4移栽

用清水淋透基质，用镊子将小苗栽入容器基质中间，轻压根部，淋透定根水。

9栽培管理

9.1水分

每天喷（淋）水1～2次，保持基质湿度80％～90％。

9.2光照

刚移栽的容器苗用遮阳网控制光照。移栽后一周内，透光度保持在40％，一周后逐渐增加光照，一个月后透光度增至70％～80％。

9.3施肥

组培苗长出新叶后，每10d喷施1次0.3％～0.5％复合肥（N:P:K=15:15:15）溶液，施肥后立即用清水冲洗叶面；生长后期施用磷、钾肥为主。出圃前15d～20d停止施肥；施肥宜在傍晚进行，避免高温时施肥。

9.4病虫害防治

9.4.1主要病虫害

病虫害防治遵循预防