DB45T 1659-2017 何首乌组培苗生产技术规程.pdf

ICS65.020.20

B05

DB45

广西壮族自治区地方标准

DB45/T1659—2017

何首乌组培苗生产技术规程

TechnicalregulationsfortissuecultureseedingofFallopiamultiflora

2017-12-30发布2018-01-30实施

广西壮族自治区质量技术监督局发布

DB45/T1659—2017

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准由广西壮族自治区农业科学院提出。

本标准起草单位：广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室。

本标准主要起草人：曾文丹、严华兵、陆柳英、谢向誉、肖亮、赖大欣。

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DB45/T16592017

何首乌组培苗生产技术规程

1范围

本标准规定了何首乌组培苗生产的组织培养、组培苗移栽、苗期管理和出圃等技术内容。

本标准适用于广西境内何首乌组培苗生产。

2组织培养

2.1培养基配制及灭菌

各阶段培养基配方参见附录A。灭菌温度为121℃,灭菌时间为22min。

2.2外植体

2.2.1母本圃种植

将优良种源种植在温室内，加强肥水管理，确保植株健壮。

2.2.2外植体的采集

宜选择连续2d以上的晴天上午进行。从健康植株上选择生长健壮、无病虫害的优良单株幼嫩茎段，

用消毒的枝剪去除叶片后剪成带一个芽的单芽茎段。

2.2.3外植体表面灭菌

2.2.3.1预处理

将带芽茎段放入加有0.2％洗洁精的溶液中浸泡并振荡5min～10min，用软毛刷清洗表面污垢，在

流水中冲洗30min～60min后备用。

2.2.3.2消毒处理

在超净工作台上，将已清洗干净的外植体转移至无菌培养瓶中，倒入75％酒精使之没过外植体，并

轻轻震荡15s～30s后将酒精倒去，用无菌水冲洗3～5次。随后，用0.1％升汞溶液浸泡处理6min～8min，

并轻摇以除去外植体表面气泡，倒出升汞后用无菌水冲洗4～5次，用无菌滤纸吸干外植体表面水分后待

用。

2.3初代培养

在超净工作台上，将表面灭菌处理的单芽茎段接入初代培养基上进行培养。培养周期为45d～55d。

培养条件：培养温度为23℃~25℃,光照强度为1500lx～2000lx，光周期14h～16h。

2.4增殖培养

在超净工作台上，将初代培养的无菌苗切成单芽茎段转接到增殖培养基上进行培养。培养周期为

30d～35d。培养条件同初代培养。

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DB45/T16592017

2.5壮苗生根培养

在超净工作台上，将继代增殖培养的不定芽切成单芽茎段转入生根培养基进行生根培养。培养周期

为25d～30d。培养条件同初代培养。

3组培苗移栽

3.1炼苗

生根培养25d～30d后，将株高3cm～5cm、生长健壮、根系发达的无污染瓶苗从培养室移入温室，

炼苗3d～5d，去除瓶盖后再炼苗1d～2d。

3.2清洗

用镊子将小苗夹出，用清水洗去生根苗根部的培养基，置于0.05％高锰酸钾溶液