DB37T 1779-2011 水产苗种中硝基呋喃类原药残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 .docx
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DB37
山东省地方标准DB37/T1779—2011
水产苗种中硝基呋喃类原药残留量的测定液相色谱-串联质谱法
2011-01-06发布2011-03-01实施
山东省质量技术监督局发布
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DB37/T1779—2011
前言
本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由山东省海洋与渔业厅提出。
本标准由山东省海洋渔业标准化技术委员会归口。
本标准起草单位：山东省海洋水产研究所、山东省水产品质量检验中心。本标准主要起草人：孙玉增、徐英江、田秀慧、张世娟、李佳蔚、于召强。
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DB37/T1779—2011
水产苗种中硝基呋喃类原药残留量的测定液相色谱-串联质谱法
1范围
本标准规定了水产苗种中硝基呋喃类原药残留量测定的液相色谱-串联质谱法。
本标准适用于水产苗种中呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃妥因和呋喃它酮残留量的测定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
《水产苗种违禁药物抽检技术规范》农业部1192号公告-1-2009
3原理
样品中硝基呋喃类原药残留用甲醇－偏磷酸溶液提取，经固相萃取柱净化后，用液相色谱-串联质谱仪测定，外标法定量。
4试剂和材料
4.1试验用水应符合GB/T6682中一级水的规定。所用试剂除另有指定外，均为分析纯。4.2甲醇：色谱纯。
4.3偏磷酸。4.4乙酸铵。
4.50.2%偏磷酸溶液：0.2g偏磷酸加100mL水溶解，混匀。
4.6甲醇-偏磷酸溶液（40＋60）：甲醇（4.1）40mL加0.2%偏磷酸溶液（4.4）60mL，混匀。4.75.0mmol/L乙酸铵溶液：称取乙酸铵（4.3）0.19g用水溶解并定容至500mL。
4.8标准品：呋喃唑酮和呋喃西林纯度均为99.0%，呋喃妥因纯度为98.5%，呋喃它酮纯度为94.0%。4.9标准储备液（100μg/mL）:准确称取呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃妥因和呋喃它酮各适量，用甲醇溶解并定容至100mL棕色容量瓶中，配成浓度为100μg/mL的标准储备液，－18℃冰箱中保存，保存期6个月。
4.10混合标准工作溶液：使用前取标准储备液（4.8），用甲醇稀释成所需浓度。
5仪器和设备
5.1液相色谱-串联质谱仪，配电喷雾（ESI）离子源。5.2涡旋混合器。
5.3离心机：7000r/min。
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5.4天平（感量0.001g）。
5.5分析天平（感量0.00001g）。
5.6HLB固相萃取柱（60mg，3mL）。5.7均质机。
5.8超声波清洗仪。5.9氮吹仪。
6试样的测定
6.1样品的制备
按照《水产苗种违禁药物抽检技术规范》执行。
6.2样品的提取
称取匀浆后样品10.0g于50mL离心管中，加入15mL甲醇－偏磷酸溶液（4.5），涡旋混合30s，超声提取10min，7000r/min离心10min，取上清液于至另一离心管中，再用15mL甲醇-偏磷酸溶液提取一次，合并上清液，备用。
6.3样品的净化
HLB固相萃取小柱依次用5mL水和5mL甲醇活化，取备用液全部过柱（流速不超过1mL/min），用5mL10%甲醇淋洗，用5mL甲醇洗脱，35℃水浴氮气吹近干。残渣用流动相溶解，定容至1mL，过0.22μm滤膜，供高效液相色谱-串联质谱仪测定。
6.4测定
6.4.1色谱条件
6.4.1.1色谱柱：BEHC18，2.1×100mm，1.7μm；或相当者。
6.4.1.2流动相：A相：5.0mmol/L乙酸铵溶液；B相：甲醇。
6.4.1.3流速：0.25mL/min。
6.4.1.4进样量：10μL。
6.4.1.5柱温：35℃。
6.4.1.6流动相梯度洗脱程序见表1。
表1流动相梯度洗脱程序
时间，min
A相，%
B相，%
0
95
5
1.0
95
5
3.0
5
95
4.0
5
95
5.0
95
5
6.4.2质谱条件条件包括：
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