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酶法拆分以及酶稳定性的研究进展.ppt

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酶法拆分以及酶稳定性的研究进展2008140618酶法拆分无环境污染拆分效率高立体专一性强生产条件温和酶法拆分的研究进展氨基酸:D-苯基甘氨酸是利用氨肽酶成功地进行了拆分。非甾体抗炎药:Moreno等利用固定化脂肪酶(CCL)催化萘普生乙酯的不对称水解,制备了光学纯度为95%的(S)-萘普生。酶法拆分的研究进展5-羟色胺拮抗物和摄取抑制剂:一种新的5-HT拮抗物MDL100907Margolin等利用脂肪酶(CCL)催化酯的水解制备了(R)-MDL100907,产品光学纯度达99%。酶法拆分的研究进展β-阻断剂:Bevinakatti等在有机溶剂中利用脂肪酶PS催化酯的不对称水解,对现有外消旋普萘洛尔生产工艺的中间体1-氯-3-萘氧-2-丙醇进行了拆分,制备了(S)-普萘洛尔的合成子(S)-1-氯-3-萘氧-2-丙醇。酶稳定性的研究进展提高稳定性1、化学修饰法交联酶结晶法:多肽链内部或分子间交联,阻止分子的展开从而稳定蛋白质。主要有:脂肪酶、青霉素酞基转移酶、枯草菌蛋白酶、嗜热菌蛋白酶。1、化学修饰法Bieniarz等人已经把这种方法用于三种特定的蛋白质:碱性磷酸酶、葡萄糖氧化酶和藻红蛋白。并进行稳定性测试,结果良好。把蛋白质分子结合到可溶性多聚本的多个结合位点上,属一种交联方式。多聚体的共价结合:1、化学修饰法表面修饰:Khajeh等用甲基顺丁烯二酸酐修饰两种细菌的α-淀粉酶的侧链赖氨酸。这两种细菌分别是嗜温B淀粉稀释细菌和地衣芽抱杆菌。结果显示有较好构象的稳定性。2、添加稳定剂盐类主要存在离子键作用,当酶的活性中心含有离子作为配位体时,降低分子内静电排斥作用,增加酶的稳定性。专利EP0758018A1描述在用盐来稳定固态植酸酶时,发现二价阳离子效果最好而且无机盐与酶的质量比控制在5%~90%效果较好。盐可作为水分子的替代物占据水的位置,排除自由水对酶造成的不稳定影响。盐多羟基化合物多羟基醇和糖类等多羟基化合物能形成氢键,通过氢键与酶蛋白表面分子相连接,使酶蛋白分子稳定化;有助于形成可增加表面张力和溶液黏度的溶剂层,降低蛋白水解而起到稳定酶的作用。还能够通过填补酶空间结构的空隙,降低由于加热引起酶空间结构改变而导致的酶活损失。专利WO93/16175描述用尿素、甘油或山梨醇等来稳定液态植酸酶。

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