第七章体内药物浓度法(已修改).ppt

样品的测定： 测定未知样品中Ag含量时， 用待测药物标准品配制一系列Ag，作出标准结合曲线； 根据未知样品得到的B/F或B%从标准曲线上查出相应待测样品中Ag的量。 使用放射免疫法（RIA）的必需条件： （1）高纯度比放射性同位素标记抗原； （2）特异性抗体； （3）有效的分离方法: 结合标记抗原（*Ag-Ab） 与 }分离(以分别计数) 非结合标记抗原（*Ag） 实例 黄夹次苷甲和次苷乙的放射免疫测定及其药物动力学 结合本例，可将放射免疫法研究药动学的主要步骤总结如下： （1）准备待测药物标准品、放射性同位素，配制专用测定试剂； 标记抗原：用氚爆射法将3H标记在黄夹次苷乙上； 制备特异性抗体：在家兔上注射活卡介苗，两周后注射抗原乳化液，使生成特异性抗体（抗血清）。 （2）实验动物给药（黄夹次苷乙），不同时间点采集血样； （3）将抗体、动物血浆、放射性标记抗原混合，在一定条件下培育，使竞争性结合反应完全； （4）分离结合标记抗原和游离标记抗原，测定放射性，计算，即得。其流程简述如下： 待测Ag样品液（即待测血样） 标准Ag液 （标准品黄夹次苷乙+空白血样） 加入抗体Ab→加标记抗*Ag →分离 测定放射性 绘制标准曲线，求回归方程 由标准曲线或回归方程求含量 →求算药物动力学参数 1.实验方法(略) 2.实验结果 2.1 抗体鉴定 2.1.1 抗体滴度和标准曲线：免疫三个月后兔体内已产生抗体，六个月后滴度达1:800左右。用此抗体作标准曲线，如图7-20所示。 ? ? 2.1.2 抗体的特异性和测定灵敏度： 类似化合物间的交叉反应按下式计算： Y50和E50分别为两个化合物的半数抑制量 如图7-21所示，抗体与 次苷乙的交叉反应率约 为100%，与单乙酰次 苷乙的交叉反应率较小 （20%），与地高辛的交 叉反应率仅为0.4%，与皮质酮的交叉反应率则低于0.2%。 ? 2.2 测定条件 2.3 黄夹苷成分的生物利用度 将豚鼠随机分为6组（每组3～4只）,静脉注射或灌胃次苷甲、次苷乙或强心灵后的血药时程见图7-22和7-23。 由图可见，次苷甲和次苷乙在动物体内的动力学行为符合线性二室模型，药物动力学参数如表7-28所示。 表7-28 豚鼠单次静注或灌胃次苷甲、次苷乙后的药动学参数(180ug/kg) 次苷甲 次苷乙 参数 静注 口服 静注 口服 A(ng/ml) 321.23 12.34 221.98 9.22 B(ng/ml) 25.69 20.75 α(h-1) 5.23 3.73 β(h-1) 0.33 0.10 T1/2α(h) 0.13 0.23 0.19 0.09