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生物化学与分子生物学试验指导补充讲义-生物探索.PDF

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生物化学与分子生物学实验指导 (补充讲义) 实验教学的组织与实施 南方医科大学 生物化学与分子生物学实验教学中心 二O 一一年九月 目 录 第1 章 实验讨论题 ………………………………………………… ………1 第2 章 实验报告的要求………………………………………………………7 第3 章 实验操作考核的要求…………………………………………………12 第4 章 设计性实验教学的组织实施…………………………………………16 一、目的要求 二、组织实施 三、设计性实验要求 四、实验设计书格式要求 五、实验设计书范例 六、历届广东大学生生物化学实验技能大赛获奖项目 第一章 实验讨论题 实验1-1 蛋白质的定量测定 (微量凯氏定氮法) 1.用微量凯氏定氮法测定蛋白质含量时,为什么要做空白管测定?消化、蒸馏和滴定 过程中各应注意什么问题? 2.使用本测定法时产生误差的可能原因有哪些? 实验1-2 蛋白质的定量测定 (双缩脲法) 1.干扰本实验的因素有哪些? 2.用双缩脲法测定血浆总蛋白浓度时,所用的试剂和仪器能否含有铵盐?为什么? 实验1-3 蛋白质的定量测定 (Folin-酚试剂法) 1.若所测得样品的浓度低于实际值,可能会有哪些影响因素? 2.该方法有什么优缺点? 实验1-4 蛋白质的定量测定 (BCA 法) 1.比较BCA 法与双缩脲法、Lowry 法有何异同? 2.BCA 法常用于科研,其有哪些特点? 实验1-5 蛋白质的定量测定 (考马斯亮蓝染色法) 根据下列所给的条件和要求,选择一种或几种常用蛋白质定量方法测定蛋白质的浓度: (1 ) 样品不易溶解,但要求结果较准确。 (2 ) 要求在半天内测定 60 个样品。 (3 ) 要求很迅速地测定一系列试管 (30 支 )中溶液的蛋白质浓度。 实验1-6 蛋白质的定量测定 (紫外吸收法) 1.若样品中含有核酸类杂质,应如何校正? 2.用紫外吸收法测定蛋白质含量有何优缺点?易受哪些因素的影响?测定时能否用玻 璃比色杯?为什么? 实验2 蛋白质相对分子量测定 (SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳) 1.在不连续体系 SDS中, 当分离胶加完后,需在其上加一层水,为什么? 2.电极缓冲液中甘氨酸的作用? 3.在不连续体系 SDS中,分离胶与浓缩胶中均
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