草鱼Viperin基因克隆与表达.docx

草鱼Viperin基因克隆与表达

目录

草鱼Viperin基因克隆与表达（1）．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

一、内容概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.1研究背景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.2研究意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

1.3研究目的与内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

二、材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

2.1实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

2.2实验设备与技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

2.3实验步骤．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

三、草鱼Viperin基因克隆．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

四、草鱼Viperin蛋白表达．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

4.1转化细胞构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

4.2蛋白表达检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

4.3诱导表达优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

五、草鱼Viperin蛋白功能研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

5.1功能实验设计．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

5.2实验结果分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

5.3功能验证．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

六、结论与展望．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

6.1研究成果总结．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

6.2存在问题与不足．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

6.3未来研究方向．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

草鱼Viperin基因克隆与表达（2）．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

一、内容综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

1.1背景介绍．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

1.2研究现状与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

二、文献综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

2.1Viperin蛋白质的功能概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

2.2基因克隆技术的发展历程．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

三、材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

3.1实验材料选择．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

3.2样本收集与处理方式．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36

3.3基因序列的获取及分析策略．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

四、克隆过程描述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40

4.1目标片段的扩增技巧．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41

4.2连接反应及转化操作要点．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42

五、表达体系构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．