芒果果实中有机酸分析方法高效液相色谱法.pdf
芒果果实中有机酸分析方法高效液相色谱法
1范围
本文件规定了采用高效液相色谱法测定芒果果实中有机酸含量的技术原理、试剂耗材、仪器设备、
样品处理、试验方法、结果分析等阶段操作指示。
本文件适用于采用高效液相色谱法对芒果果实中多种有机酸含量的测定。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
文件。
GB6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4技术原理
将芒果果实试样进行打浆离心处理后,取上清液测定其中有机酸含量。采用高效液相色谱(HPLC)
与紫外检测相结合的方式,运用外标法定量分析各有机酸成分。
5试剂耗材
一般要求
除特殊注明外,本文件所用试剂均为分析纯,水应符合GB6682中一级水的规定。
试剂
5.2.1磷酸二氢钾(KHPO):ρ2.238 g/cm³,纯度≥98.0%。
24
5.2.2磷酸(HPO):ρ1.685 g/cm³,纯度≥85.0%。
34
5.2.3甲醇(CHO):ρ0.7866 g/cm³,纯度≥99.9%。4
5.2.4浓硫酸(H₂SO₄):ρ1.84 g/cm³,含量≥98.0%。
标准品
5.3.1琥珀酸(CHO):ρ1.572 g/cm³,纯度≥98.0%。
464
5.3.2酒石酸(CHO):ρ1.886 g/cm³,纯度≥98.0%。
466
5.3.3柠檬酸(CHO):ρ1.542 g/cm³,纯度≥98.0%。
687
5.3.4苹果酸(CHO):ρ1.609 g/cm³,纯度≥98.0%。
465
5.3.5乳酸(CHO):ρ1.209 g/cm³,纯度≥98.0%。
363
5.3.6乙酸(CHCOOH):ρ1.05 g/cm³,纯度≥98.0%。3
5.3.7a-酮戊二酸(CHO):ρ1.05 g/cm³,纯度≥98.0%。
565
5.3.8草酸(HCO):ρ1.772 g/cm³,纯度≥98.0%。
224
5.3.9富马酸(CHO):ρ1.63 g/cm³,纯度≥98.0%。
444
5.3.10奎宁酸(CHO):ρ1.64 g/cm³,纯度≥98.0%。
7126
5.3.11没食子酸(CHO):ρ1.694 g/cm³,纯度≥98.0%。
765
1
试剂配制
准确称取磷酸二氢钾(5.2.1)1.3609 g于小烧杯中,加水溶解,转移至1000 mL容量瓶中,定容并
混匀,配成0.01 mol/L的磷酸二氢钾溶液。随后用磷酸(5.2.2)调节pH2.8;取15 mL的甲醇(5.2.3)
与985 mL的0.01 mol/L磷酸二氢钾溶液(pH2.8)混合均匀。
标准溶液配制
5.5.120 g/L有机酸单标标准储备液
分别准确称取0.20 g的琥珀酸(5.3.1)、酒石酸(5.3.2)、柠檬酸(5.3.3)、苹果酸(5.3.4)、乳
酸(5.3.5)、乙酸(5.3.6)、奎宁酸(5.3.11)于10 mL的各自棕色容量瓶中,加水溶解并定容,混匀,
于-20℃条件下保存,有效期为12个月。
5.5.210 g/L有机酸单标标准储备液
准确称取0.10 g的草酸(5.3.8)于10 mL的棕色容量瓶中,加水溶解并定容,混匀,于-20℃条件下
保存,有效期为12个月。
5.5.34 g/L有机酸单标标准储备液
分别准确称取0.