《疟原虫核酸检测 多重PCR法》.pdf

ICS11.020

CCSC62

团体标准

T/SPMA010—2023

疟原虫核酸检测多重PCR法

DetectionofmalariaparasitenucleicacidbymultiplexPCRmethods

2023-08-08发布2023-08-08实施

上海市预防医学会发布

T/SPMA010—2023

目次

前言II

引言III

1范围1

2规范性引用文件1

3术语和定义1

4仪器设备2

5试剂材料2

6检测步骤3

7废弃物的处理和防止污染的措施4

附录A（资料性）多重PCR技术原理5

附录B（规范性）多重PCR检测方法6

附录C（规范性）多重荧光PCR检测方法10

附录D（规范性）试剂的配制15

附录E（规范性）样本准备16

参考文献17

I

T/SPMA010—2023

疟原虫核酸检测多重PCR法

1范围

本文件规定了疟原虫核酸检测多重PCR和多重荧光PCR的方法。

本文件适用于人体血液样本中疟原虫检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB19489实验室生物安全通用要求

WS/T230临床诊断中聚合酶链反应（PCR）技术的应用

WS/T569疟原虫检测血涂片镜检法

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

疟原虫Plasmodiumspp.

疟原虫是一类单细胞、寄生性的真核动物，是疟疾（malaria）的病原体。寄生于人体的疟原虫主

要有恶性疟原虫(Plasmodiumfalciparum)、间日疟原虫(Plasmodiumvivax)、三日疟原虫(Plasmodium

malariae)和卵形疟原虫(Plasmodiumovale)等。

[来源：WS/T569-2017，2.1]

3.2

疟原虫核酸检测plasmodiumnucleicacidtesting

采用核酸检测方法，从疟疾患者血液样本中检测疟原虫特异性基因片段。

3.3

多重PCRmultiplexPCR

在同一PCR反应管中同时加入多对特异性引物进行PCR扩增，可用于同时检测多种病原体或鉴定同属

不同种的病原体感染。

：

注本文件中所述的多重PCR包含了常规的多重PCR和多重荧光PCR两种方法，两种多重PCR方法的技术原理见附录A。

3.4

Ct值cyclethreshold

每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数。

1

T/SPMA010—2023

4仪器设备

4.1PCR扩增仪：温度范围为4℃～99℃，温度精确为0.1℃，热盖为105℃。

4.2凝胶成像系统：图像分辨率大于140万，光源为透射U